4.3《酵母菌细胞的固定化》学案.docVIP

课题3 酵母细胞的固定化学案 【学习目标】 1．说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 2．尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 【学习过程】 一、课题背景 【活动1】阅读教材P49“课题背景”，讨论并回答下列问题： 酶：优点：催化效率高，低耗能、低污染，大规模地应用于食品、化工等各个领域。 实际问题：对环境条件敏感， ；溶液中的酶很难回收，不能 ，提高了生产成本；反应后的酶会混合在产物中，如不除去，会影响产品质量。 设想： 固定化酶：优点 实际问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的。 设想： 固定化细胞：优点 二、基础知识 【活动2】阅读教材P49“（一）固定化酶的应用实例”，讨论并回答下列问题： 高果糖浆的生产原理是： 2．能将葡萄糖转化为果糖的酶是 。使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种 上，再将这些酶颗粒装到一个 内，柱子底端装上分布着许多小孔的 。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将 溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与 接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。 【活动3】阅读教材P50“（二）固定化技术的方法”，讨论并回答下列问题： 1．固定化酶和固定化细胞是利用 或 方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。包括 、 和 法。 2．酶和细胞的固定方法和特点比较 固定对象 酶 细胞 适宜方法 特点 一次只能固定 种酶； 酶分子体积小，包埋法易丢失 一次可以固定 酶； 细胞体积大，难以化学吸附和结合 3．包埋法法固定化细胞即将微生物细胞 包埋在不溶于水的 中。常用的载体有 、 、 、 和 等。 【思考1】若将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应，应当固定 ；若将蛋白质变成氨基酸，应当固定 （酶、细胞）。 实验操作 【活动4】阅读教材P49“制备固定化酵母细胞”，讨论并回答下列问题： 1．活化酵母细胞：1g干酵母＋10mL →50mL烧杯→搅拌均匀→放置1h使之 （即：将处于 状态的微生物重新恢复 状态的过程）。 2．配制CaCl2溶液：0.83gCaCl2＋150mL →200mL烧杯→溶解备用。 3．配制海藻酸钠溶液：0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒精灯 火（或间断）加热，并不断搅拌使之溶化→ 定容到10mL。 4．海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合：将海藻酸钠溶液冷却至 ，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到 中。 5．固定酵母细胞：将注射器中的混合液滴加到 溶液中，形成 状颗粒。 【活动5】阅读教材P50“固定化酵母细胞的发酵”，讨论并回答下列问题： 1．将固定的酵母细胞凝胶珠用 冲洗2～3次。 2．150mL10％葡萄糖＋固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→ →25℃发酵24h。 【思考2】发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 【思考3】在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ 3．根据以上设计，绘出酵母细胞的固定化及其酒精发酵的流程图： （五）、结果分析与评价 （一）观察凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 （二）观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多 ，同时会闻到 。