PEG修饰方法.pdf

化学通报 2003 年 第66 卷 w119 聚乙二醇修饰蛋白质的活化与检测方法 秦海娜 修志龙* (大连理工大学生物工程系 大连 116012) 摘 要 聚乙二醇共价修饰蛋白质药物可以消除蛋白质药物的抗原性及免疫原性 延长小分子 多肽在体内的半衰期 本文对该项技术最近的制备 分离 分析方法及各种方法的优缺点作一介绍 并对不同蛋白质需采用的分析方法提出了一点建议 关键词 聚乙二醇 修饰 活化 分离 分析 Methods of Polyethylene Glycol(PEG) Activation and Analysis Methods for Polyethylene glycolated Protein Qin Haina, Xiu Zhilong* (The Department of Biotechnology of Dalian University of Technology Dalian 116023) Abstract Polyethylene Glycol(PEG) modification of protein drugs is a practical method to reduce the immunogenicity and to prolong the half life of protein in plasma. In this article, we introduce the methods of preparation, analysis and separation of modified proteins, and put forward some advices about the appropriate methods for different protein analysis. Key words Polyethylene glycolated, Modification, Activation, Separation, Analysis 近年来随着基因工程技术的发展 用于疾病治疗的多肽 酶 细胞因子等蛋白类药物越来 越多地被研究开发 这类药物具有专一性强 时效高等优点 但也有许多不尽人意的地方 如( 1) 大多数药物具有抗原性及免疫原性 (2)容易从循环系统中被快速清除 (3)定位给药困难 (4)不 [1] 稳定 容易被酶类降解 且来源稀少等 为了克服基因工程蛋白类药物的上述缺陷 许多研 究人员正设法对蛋白质进行结构改造或化学修饰[2~4] 化学修饰法是指在分子水平上对蛋白质进行改造 即在体外将蛋白质的侧链基团通过人工 方法与一些化学基团 特别是具有生物相容性的大分子进行共价连接 从而改变蛋白质的性质 其主要优点是可以延长蛋白质在体内的半衰期 降低免疫原性和抗原性 另外还可以减弱蛋白 酶的水解作用 增加蛋白分子的可溶性等 蛋白质的免疫原性是由于其分子表面的抗原簇所决 定的 应用线性 亲水 惰性的高分子与蛋白质的非活性必需基团结合 在其表面形成屏蔽 使其不被识别 不产生相应抗体 从而抑制相应的免疫反应 而连接大分子聚合物后 药物的 分子量显著增大 不易被肾小球所过滤 从而延长在体内的半衰期 另外 由于大分子亲水性 聚合物的表面遮蔽作用在一定程度上减少了蛋白药物与蛋白酶的相互作用 使药物的稳定性进 一步提高 用于蛋白质修饰的大分子很多 常见的有如下类型 聚乙二醇(包括聚乙二醇 PEG 秦海娜 女 23 岁 硕士生 目前从事聚乙二醇修饰水蛭素的研究工作 *联系人E-mail: zlxiu@ 2003-01-13 收稿 化学通报 2003 年 第66 卷 w119 和单甲基聚乙二醇 mPEG) 多糖类 如葡聚糖 右旋糖酐 淀粉等 同源蛋白质及人工合成的 多肽 如聚丙氨酸等 其中聚乙二醇由于其良好的生物相容性 反应简单 价格低廉等优点受 到较多的重视[1]