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多肽药物的含量测定方法详解
肽类药物的含量测定方法;一 、酸碱滴定法;二、 紫外分度光度法
;方法原理: 供试品加0.01mol/L氨溶液定量稀释,制成供试液,置紫外可见分光光度计,于280nm波长处测定吸收度,计算出其含量。
试剂: 氨溶液(0.01mol/L) 标准品:E1%1cm 为70计算
仪器设备: 紫外可见分光光度计
;三、效价测定法;(1)底物溶液的制备;(4) 测定法;效价单位定义
能抑制一个胰蛋白酶单位[每秒钟能水解1μmol的N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)为一个胰蛋白酶单位(microkatal)]的活力称为一个抑肽酶活力单位(EPU)。每1EPU的抑肽酶相当于1800KIU。;实例(2)杆菌肽效价测定:
利用杆菌肽能够抑制微生物生长特性,进行实验设计。通过与标准品对微生物产生抑菌圈面积的大小,从而得到待测样品相对与标准品的效价;总结:
在进行多肽药物含量进行测定时可以采用了两种形式:
第一种???于比较精准的定量——如酸碱滴定法和紫外分光光度法。这两种方法都是利用多肽分子结构上的特点。方法一利用游离的氨基或羧基,使多肽表现出酸碱性,可以利用低浓度酸或碱进行滴定;方法二利用某些特性的官能团来进行定量。因此再要进行对某种多肽物质进行定量时,可以从结构特性下手,利用特性化学反应或者物理特性进行定量。
第二种属于一种比较抽象的定量方式——效价测定。跟酶活力单位类似是一个可以随人为规定变化而变化的,但通过规定统一标准,具有可比性。在效价测定的实例中,可以得出它们都是基于该多肽药物具有某种特殊的药效。抑肽酶可以抑制抑制胰蛋白酶的活性,杆菌肽可以抑制藤黄微球菌的生长,缩宫素可以促进子宫的收缩。因此在测定某多肽药物的效价时,可以结合该药物所具有的特定功能进行实验设计,来测定其效价!
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