双波长和三波长分光光度法.pptVIP

第二节 双波长和三波长分光光度法 一．双波长分光光度法的原理 双波长分光光度法是在传统的单波长分光度法的基础上发展起来的。单波长分光光度法要求式样本身透明，不能有混浊，如果是试样溶液在测量过程中逐渐产生浑浊便无法正确测定。对于吸收峰相互重叠的组分或背景很深的试样分析，也很难得到准确的结果。 双波长分光光度法的建立，在一定程度上克服了单波长法的局限性，扩展了分光光度法的应用范围，在选择性、灵敏度和测量精密度等方面都比单波长法有进一步的改善和提高。 * * 1．基本原理 对于混浊试样或成分复杂、背景吸收较大的试样，采用经典的分光光度法就难以找到合适的参比溶液来消除其干扰。若采用双波长分光光度法，将λ2选择在被测组分的最大吸收波长处，λ1选择在基本无吸收的波长处，这样可以从分析波长的信号中减去参比波长的信号，消除了干扰，大大提高了方法的选择性和灵敏度。 单组分的分析 测定波长λ2和λ1通常选用被测组分的最大吸收波长和等吸光点波长进行测定。若无等吸光点或等吸光点无法准确确定，可以选用被测组分的最大吸收波长和该组分吸收光谱曲线下端的某一波长作为测定波长。 (2) 双组分中某一组分的分析 试样中含有A、B两组分，组分B干扰组分A的测定。若采用双波长分光光度法，可不分离B而直接测定A的含量。 等