第12章dna的复制与转录01.ppt

第三篇 遗传信息的传递 生物化学教研室 赵文锋 第十二章 DNA的复制与转录Chapter 11 DNA Replication and Transcription 第一节 DNA复制section 1 DNA replication DNA复制(replication)： 是指 DNA 以自身为模板(template)， 合成新的子代 DNA 分子的过程。 是 遗传信息传递的分子基础。 1.半保留复制(semi-conservative replication): 一个DNA分子可复制成两个DNA分子，新合成的两个子代DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。每个子代DNA中有一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成链，这种合成方式称为半保留复制。 解链过程形成正超螺旋。 3. 拓扑异构酶（topoismerase） ： 在DNA复制过程中，能够使超螺旋放松引起拓扑异构反应的酶称为拓扑异构酶。 需要ATP 不需要能量 能 量 需 求 两条链 一条链 作 用 方 式 正超螺旋 负超螺旋 松弛双螺旋类型 Ⅱ型 Ⅰ型 类 型 拓扑异构酶的种类与功能 4. 解链酶（helicase）： 是参与DNA双链解开的酶类(又称为解螺旋酶)，这类酶蛋白一旦与双链DNA结合，就会引起DNA双链解离，使两条分开的链呈线性。解链需要ATP供能。 在原核生物中，负责解开DNA模板双链的是Dna B蛋白，解链过程由ATP供能。 在以SV40病毒基因组的复制为代表的真核生物基因组DNA复制模型中，担负解开DNA双螺旋作用的酶是一种被称为T抗原(T antigen)的蛋白。 5. SSB (single strand binding protein)蛋白 ： 当DNA双螺旋被解链酶解开后立即与解开的单链相结合，阻止复性并防止单链DNA被核酸酶降解。 原核生物 Dna G蛋白 某些质粒和线粒体DNA RNA聚合酶 6. 引物酶（primase） ： 在DNA复制中，负责合成RNA引物的酶称为引物酶。 真核生物 DNA Pol α 7. 其它参与DNA复制的细胞组分 ： dNTP、DNA模板及其它细胞蛋白和辅助因子。 四、DNA复制的过程 复制过程可分为三个阶段：起始、延伸和终止。 1. 原核生物DNA复制： (1) 复制的起始(initiation) ： Ori C 超螺旋DNA模板 Dna A 蛋白 向结合区靠近 与结合位点 结合的Dna A蛋白 13-bp segments: GATCTNTTNTTTT 9-bp segments: TTATCCACA 起始复合物 Dna A 富含Dna A蛋白的缠绕区 分离的 DNA双螺旋 开链复合物 ATP ADP Pi + Dna B + Dna C 六聚体 Dna T Dna C 亚基 Dna B 打开的起始位点 前引发复合物 SSB 四聚体 引物酶复合体 Dna A 引发体 NTPs Dna A 主导链 的RNA引物 主导链 的RNA引物 NTPs Dna A 后随链的 RNA引物 后随链的 RNA引物 Dna A 5 3 3 5 5 5 DNA Pol III dNTPs NTPs DNA Pol III DNA Pol III 后随链的 RNA引物 后随链的 RNA引物 (2) 复制的延伸(elongation) ： 合成前导链的DNA Pol III核心酶 合成后随链的DNA Pol III核心酶 第1个RNA引物 第3个RNA引物 第2个RNA引物 延长中的冈崎片段 引发体 解链酶 Rep 蛋白 即将被DNA Pol I切除的第1个RNA引物 第3个RNA引物 接近完成的 冈崎片段 第2个RNA引物 第4个RNA引物 第3个RNA引物 新合成的冈崎片段 第2个RNA引物 复制过程简图 (3) 复制的终止(termination) ： ◆ 细菌环状染色体的复制通常为双向复制，两个复制叉在终止区(terminus region)相遇并停止复制，终止区为含有多个终止子(terminator，约22bp)位点的区域。 ◆ 复制过程终止，复制体也随之解体，拓扑异构酶 IV负责解开环链体，DNA Pol I降解RNA引物并将缺口补平成切口，DNA连接酶将切口连接，完成复制过程。 2. 真核生物DNA复制： 真核生物与原核生物DNA复制的差异 ① 多复制子与单复制子的差异 ◆多复制起点与慢复制速度的协调 ◆复制子大小： 细菌 105~107bp 真核生