流式细胞术检测植物核DNA含量与倍性水平.pdf

中国科技论文在线 流式细胞术检测植物核DNA含量和倍性水平 1 2* 弓娜 ，周香艳 （1. 兰州大学分子生态实验室，兰州 730000； 2. 甘肃农业大学生命科学技术学院，兰州 730000） 摘要：植物的核 DNA含量和倍性水平是植物学研究中重要的基础研究指标。流式细胞仪作为 检测这些指标的高效工具，在植物学研究的多个领域都发挥了重要作用。本实验室通过大量 的植物流式细胞术实验，总结出一套详细通用的实验方法，同时本文阐述了各个实验环节的 关键点，并分析了解决因碎片过多而导致实验失败的原因及解决办法，对今后进行植物流式 实验具有指导意义。 关键词：流式细胞术；植物核DNA 含量；倍性水平；C值 中图分类号：Q94-336 Analysis of nuclear DNA content and ploid level in plant cells by flow cytometry 1 2 Gong Na , Zhou Xiangyang (1. Laboratory of Molecular Ecology, Lanzhou University, LanZhou 730000; 2. School of Life Sciences, Gansu Agriculture University, LanZhou 730000) Abstract: Nuclear DNA content and ploidy level are key biological characters in the study of botany. As an efficient tool to measure them, flow cytometry has been playing very important role in many fields of botany research. Through plenty of flow cytometry experiments, our lab came up with a set of universal experimental procedure, at the same time, we have elaborated key points at every experimental stage and solutions to the problems caused by too much fragments which can result in the failure of an experiment, which may provide guidance for the future experiments. Keywords:Flow cytometry;Nuclear DNA content;ploidy level;C-value 0 引言 20 世纪 80 年代以来，随着流式细胞仪和荧光探针标记技术的不断发展，流式细胞术在 现代科学研究及科学实践中的作用越来越重要。流式细胞术（Flow Cytometry，FCM ）是应 用流式细胞仪进行分析、分选的技术，可以对处于液流中的各种荧光标记的微粒进行多参数 快速准确的定性、定量测定。在生物科学研究中，可以使用流式细胞术测定细胞周期、DNA 含量，检测细胞凋亡，进行倍性、染色体核型和流式分子表型分析等[1-4] 。植物学研究中， 流式细胞术主要用于检测植物细胞核 DNA 含量及其倍性水平[5-8] 。在医学研究及临床实践的 应用中，流式细胞术也发挥了重要的作用，例如肿瘤诊断和分型、血液病的诊断和治疗及免 疫相关疾病分析等方面的应用[9-12] 。 生物体的单倍体基因组所含 DNA 总量称为 C 值。C 值是一个很重要的植物学特征，成 为植物学家进行种群进化、物种分类和生态学研究的有用分析工具和证据[13] 。由于近缘物