高温设备管理及使用.pptVIP

* * * * * * 三、电热恒温干燥箱 注意：此设备只用于薄层板的加热。 （一）色谱定义 色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术 流动相：携带样品流过整个系统的流体 固定相：静止不动的一相，色谱柱 四、高效液相色谱（HPLC） 简单的操作流程图 （二）HPLC分类 反相色谱（ reversed phase chromatography） 离子对色谱（ ion-pair chromatography） 正相色谱（ normal phase chromatography） 离子交换色谱（ ion exchange chromatography） 尺寸排阻色谱（ GPC / GFC） 1、反相色谱 ——流动相的极性大于固定相的极性 C18 (ODS) TMS（三甲基硅烷） C8 (octyl) 氰基 C4 (butyl) 苯基 2、正相色谱 ——流动相的极性小于固定相的极性 硅 胶 柱 : 常用 氰 基 柱 : 常用 氨 基 柱 : 分析糖 二醇基柱 : 分析蛋白质 3、反相色谱与正相色谱的对比 反相 – 保留时间重现性好 – 固定相耐用 正相 – 对立体异构体有很好的分离 – 保留时间重现性稍差 三、溶剂前处理 1、过滤 过滤： 0.45 μm或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液 滤膜类型： 聚四氟乙烯滤膜： 适用于所有溶剂，酸和盐。 醋酸纤维滤膜： 不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。 尼龙66滤膜： 适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于DMF（二甲基甲酰胺）， THF（四氢呋喃）， CHCl3 等溶剂 再生纤维素滤膜： 蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂 2、脱气 脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 3、常用脱气方法 四、岛津高效液相色谱操作流程 1、开机 依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器和控制台（最后打开控制台），再打开电脑，开启LCsolution软件 1.1双击??(LCsolution)? 图标 1.2单击屏幕左侧的[操作]?标签 2、启动“LC?实时分析” 2.1单击【分析1】图标 2.2对于【用户ID】，选择【Admin】并保留【密码】为空白。单击【确定】 3、设置仪器参数 3.1请确保在?【LC?实时分析】窗口的状态显示区域中显示为?【就绪】 3.2在【仪器参数视图】?中，设置在分析中要使用的仪器参数。 单击【正常】在其中输入分析条件，例如测量时间、泵流速、检测器波长和柱温箱温度等。 单击【高级】设置泵的压力，MAX一般设为20.0MPa，MIN一般设为0.0MPa。点击“下载”按钮，装载操作方法。 4、进样 将样品加入进样瓶中（用 0.45μm或更小孔径滤膜滤过），放在样品架上，记下放置的位置编号 4.1单次进样 点击“单次运行”按钮，出现单次运行的对话框。 核实方法文件的出处和名称，核实数据文件的出处和名称。输入样品瓶和进样体积。（样品架输入“1”；如果是空针，样品瓶输入“-1”）。完成后，点击“确定”，开始检测。 5、设置积分参数 5.1单击?【采集】助手栏中的?（数据分析）图标。导入采集的数据文件后，启动“LC?再解析”的“LC?数据分析” 5.2打开作为分析结果创建的另一数据文件 5.3用鼠标右键在?【色谱图视图】上单击，从显示的菜单中选择?【数据分析参数】 5.4单击【积分】标签，输入适当的积分参数值。然后单击【应用】 5.5一旦获取了适合的积分结果，单击【确定 】 注意 如果在此时无法获取适合的积分结果，则可以使用 “积分时间程序”执行积分，这样具有更大的灵活性。 通过单击 【 积分 】标签上的 （时间程序）按钮可以启动 “积分时间程序” 6、批处理分析 6.1创建批处理表 6.1.1单击“LC?实时分析”助手栏中的??（批处理）图标 6.1.2从?【文件】?菜单中选择【新建批处理文件】 6.1.3编辑批处理表 6.1.4命名批处理表并保存 6.2执行批处理分析 在“LC?实时分析”中打开批处理表时，单击?【批处理】助手栏中的??（批处理开始） 注意 ??如果暂停批处理分析，在继续当前分析的同时，可以修改随后的批处理表。 ??要暂停当前正在分析的行的批处理分析，或者要重新开始暂停的批处理分析，单击【批处理】助手栏中的?（暂停/重新开始）图标。 ??要停止批处理分析，单击【批处理】助手栏中的?（停止）图标。 2016 2016 高温设备的管理及液