不同植物激素对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的比较研究.docVIP

不同植物激素对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的比较研究 不同植物激素对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的比较研究 引言 　　蓝莓（Blueberry）又名越橘、蓝浆果，属杜鹃科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium）。蓝莓果实风味独特，营养丰富，含有丰富的维生素、矿物质和抗氧化物质，特别是其中所含的花青素、儿茶酸，有防治高血压、疏通毛细血管和缓解视力疲劳的作用，被誉为浆果之王，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一[1-2]。对于蓝莓茎段诱导植株再生的研究比较多，并且获得了丰厚的成果，技术比较成熟[3-5]，但以蓝莓外植体诱导愈伤组织的研究几乎没有。韩婷婷等以WPM1/2为适宜培养基使矮丛蓝莓Blomidon品种的试管苗叶片诱导愈伤率高达100%[6]。因此，本实验以蓝莓幼茎作为外植体，研究不同植物激素诱导蓝莓愈伤组织的情况，为蓝莓组培快繁提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　以高丛蓝莓瑞卡幼茎作为外植体，以改良WPM培养基为培养基，设定蔗糖浓度为30g/L，琼脂8g/L，PH为5.5，在宿州学院东区组培室内进行培养。 　　1.2 方法 　　1.2.1 材料处理 　　剪下蓝莓幼茎后流水冲洗2h，之后在无菌操作台上进行消毒和灭菌。用70%酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，0.05%氯化汞灭菌6～8min，无菌水冲洗8次，然后将幼茎用无菌滤纸吸干水分，备用。 　　1.2.2 愈伤组织的诱导 　　将幼茎的两端分别减去一小部分，横放于含有不同浓度激素组合的改良WPM培养基中，每瓶接种5～6个茎段，分别添加TDZ，ZT， 6-BA，2，4-D各0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L五个浓度梯度做单因素五水平实验，每种浓度接种10瓶，45d后统计出愈率和愈伤组织长势，旨在选出幼茎诱导愈伤组织最适宜的植物激素，并探讨每种植物激素对愈伤组织诱导的影响。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同浓度的TDZ对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 　　统计结果表明，TDZ对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的效果不好，愈伤率很低，而且基本全部褐化。 　　2.2 不同浓度的ZT对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 　　实验结果表明，ZT对蓝莓茎段诱导愈伤组织效果不好，当浓度大于1.0 mg/L时开始出芽，当浓度大于1.5 mg/L时愈伤组织褐化现象严重。 　　2.3 不同浓度的2，4-D对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 　　实验结果表明，当2，4-D浓度为0.5～1.0 mg/L时诱导处的愈伤组织均为绿色、疏松颗粒状愈伤组织，当浓度大于1.5时，随着2，4-D浓度的增大愈伤率随之提高，但褐化率也随之增大。 　　2.4 不同浓度的6-BA对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 　　统计结果表明，当6-BA浓度为0.5 mg/L时，无愈伤组织诱导产生，当6-BA浓度大于1.0mg/L时有愈伤组织产生，但有芽诱导产生而且还有褐化现象。 　　从以上实验得知： TDZ对蓝莓幼茎诱导愈伤组织时褐化现象严重，并且浓度越大褐化越严重，当其浓度在1.0mg/L以上时褐化率超过50%，同时愈伤率也不高; 低浓度的ZT对蓝莓幼茎诱导愈伤组织效果不好，高浓度时出现出芽和褐化现象;使用6-BA时对愈伤组织诱导作用最小，愈伤率很低，褐化率也较低。使用2，4-D时愈伤率最高，褐化率也较低，当其浓度为1.0mg/L时诱导效果最好，诱导出的愈伤组织为淡黄色的疏松颗粒状较大的愈伤组织。 1