人真皮成纤维细胞.PDFVIP

人真皮成纤维细胞 Cat NO.: CP-H103 一、产品简介 1. 产品名称：人真皮成纤维细胞 2. 组织来源：皮肤组织 5 3. 产品规格：5×10 cells/T25细胞培养瓶 4. 细胞简介： 人真皮成纤维细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织 相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内 分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧 性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维 以及基质。 成纤维细胞（Fibroblast ）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间 充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁 平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺 盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以 实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺 损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好， 悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h 后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集 成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长， 平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并 彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生 理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态，合成和释放细胞外基质 以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。 本公司生产的真皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混 5 合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5 ×10 cells/瓶；细胞经Vimentin 免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有HIV-1、HBV 、HCV 、支原体、细 菌、酵母和真菌等。 5. 培养基信息： DMEM[H] 、FBS 、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin 、Streptomycin等 我们推荐使用Procell人真皮成纤维细胞专用完全培养基 （产品货号：CM-H103 ）作为 体外培养人真皮成纤维细胞的培养基。 二、细胞培养状态 武汉普诺赛生命科技有限公司 网站： 全国免费服务电话：400-650-3656 邮箱：techsupport@ sales@ 发货时发送细胞电子版照片 三、使用方法 在Procell技术部标准操作流程下，人真皮成纤维细胞可传8代左右，随着传代次数 的增加，细胞会呈现老化状态，生长速度减缓，4代以内细胞状态最佳；建议您收到细 胞后尽快进行相关实验。 客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。 1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO 、饱 2 和湿度的细胞培养箱中静置3-4h ，以稳定细胞状态。 2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 3. 细胞传代 1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次； 2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培 养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min ；倒置显微镜下观察，待 细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化； 3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2-1:3适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全 培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置