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双法便潜血的临床应用评价 　　作者：孙建珍 　作者单位： 102200 北京，北京市昌平区医院检验科 【摘要】 目的 通过两种便隐血实验方法的检测结果分析，探讨双法便隐血在临床应用的可行性及价值。方法 应用匹拉米洞化学法和胶体金单克隆抗体免疫法测试临床送检标本90例和健康体检者标本61例。将临床送检标本分为柏油便组31例和非柏油便组59例，分别进行统计。结果 胶体金单克隆抗体免疫法在临床送检标本中阳性检出率低于匹拉米洞化学法，非柏油便组分别为44.1%和52.5%，有统计学差异；柏油便组为64.5%和100%，两者差异有非常显著性；而在健康体检者中的阳性检出率高于匹拉米洞化学法。结论 胶体金单克隆抗体免疫法灵敏、特异、抗干扰性强，但可出现假阴性结果；匹拉米洞化学法易出现假阳性反应。在临床工作中两种方法结合使用，可获得更准确的实验结果并可对出血部位进行定位，有较好的临床应用价值。 　　【关键词】 隐血；胶体金；单克隆抗体 　　粪便隐血试验（fecal occult test，FOBT）是诊断各种原因引起的消化道出血及筛选诊断胃肠道恶性肿瘤的重要手段。目前常用检测方法有两种：化学法和免疫法，但由于方法本身的局限性可出现假阳性和假阴性反应。我院近6个月来采用匹拉米洞化学法和胶体金单克隆抗体免疫法测试粪便隐血，并进行了比较，现将结果报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 标本来源 　　本院住院患者送检粪便标本90例，31例为柏油便标本，59例为非柏油便标本；随机抽取健康体检者送检粪便标本61例。 　　1.2 试剂 　　胶体金单克隆抗体免疫法隐血测试板，购自北京万华普曼生物技术有限公司，批号为S010066；匹拉米洞化学法隐血试剂：5%匹拉米洞、3%过氧化氢、冰醋酸。 　　1.3 方法 　　1.3.1 胶体金单克隆抗体免疫法 　　用配套的采便棒自粪便标本的多个不同部位或病变部分采集粪便后放回含有稀释液的粪便采集瓶内，充分振摇混匀；试验时打开滴瓶往隐血测试板的圆孔内垂直滴入2～3滴混悬液，5min内观察结果，出现两条红线为阳性。 　　1.3.2 匹拉米洞化学法 　　用棉签蘸取5%匹拉米洞试剂，再滴加2滴3%过氧化氢和冰醋酸，应不显色；再用竹签挑取粪便少许涂于棉签上，在2min内显示蓝紫色为阳性。 　　2 结果 　　2.1 59例非柏油便标本检测结果 　　见表1。经Χ2检验，Χ2值为3.2［Χ2（0.1，1）=2.71］，P＜0.01，两者有统计学差异。胶体金单克隆抗体免疫法检出26例阳性者，匹拉米洞化学法全部阳性，而5例化学法阳性者，免疫法均为阴性，经咨询病史和饮食情况，除1例服用富马酸亚铁外，其他人近日曾食用肉食、血、豆腐等。表1 59例非柏油便标本检测结果（略） 　　2.2 31例柏油便标本检测结果 　　见表2。经Χ2检验，Χ2值为9.09［Χ2（0.005，1）=7.88］，P＜0.005，两者差异有非常显著性。其中胶体金法为阴性的11例柏油便标本经1∶50～1∶100稀释后，检出阳性9例，胶体金法总阳性率93.5%。表2 31例柏油便标本检测结果（略） 　　2.3 61例正常体检组便隐血结果 　　见表3。胶体金单克隆抗体免疫法检出3例阳性，匹拉米洞化学法未检出阳性标本，嘱体检者隔1个月后复查。表3 61例体检者便标本检测结果（略） 　　3 讨论 　　粪便隐血实验是消化道疾病辅助诊断试验。自1864年Van deen发明了愈创木脂法检测便隐血以来，人们不断探索，分别用过匹拉米洞法、孔雀绿法、邻-联甲苯胺法，它们都是基于血红蛋白（Hb）中的亚铁血红素有过氧化物酶活性，可催化过氧化氢（H2O2）释放新生态氧，使上述色原显色这一原理，显色的深浅反映了Hb的多少，即出血量的大小。因此在方法学上缺乏特异性，此方法受饮食影响很大。 　　近年来，免疫学的发展对便隐血检验方法改进产生了很大影响。胶体金单克隆抗体免疫法利用金标Hb-抗体与Hb结合后，向上扩散分别与测试区的抗-Hb抗体及对照区的Hb结合，此时胶体金的颗粒聚集呈颜色反应，它只特异地针对人-Hb抗原表位，基本排除了饮食及药物因素的干扰，被世界卫生组织（WHO）和世界胃肠镜检查协会推荐作为粪便隐血实验的一种较为确认的方法［1］。 　　匹拉米洞化学法属于中度灵敏的试验，可检出1～5mg/L的Hb，消化道5～10ml出血即为阳性。但缺乏特异性和准确性，易出现假阳性反应，外源性动物食品如含有Hb、肌红蛋白，其含铁血红素的作