大豆异黄酮提取与纯化方法研究(上).doc

大豆异黄酮提取与纯化方法研究(上) 作者：佚名????科研信息来源：本站原创????点击数： 438????更新时间：2006-5-10 [关键词]：大豆异黄酮,提取,纯化 健康网讯： ???大豆异黄酮（soybean isoflavones，简称ISO）是黄酮类混合物，其母核结构为3-苯并吡喃酮，是存在于大豆等豆科植物中的一类重要的生物活性物质。目前已经从大豆中分离出的单体化合物主要有：大豆苷（daidzin）、染料木苷（genistin）、黄豆苷（glycitin）：大豆素（daidzein）、染料木素（genistein（和黄豆素（glycitein）等。现代药理研究表明ISO及其单体化合物具有较强的抗氧化和抗真菌活性，具有防治心血管疾病、预防癌症、治疗骨质疏松症和减缓妇女更年期综合症等多种功效。但自然界中大豆异黄酮的资源十分有限，在大豆中的含量也仅有0.1%～0.5%，作为一种具有广阔开发前景的药用植物活性成分，如何高效率地提取大豆异黄酮、确定最佳的提取纯化方法显得尤为重要。近年来国内外学者对ISO的提取及分离纯化工艺进行了大量的研究，现将其主要研究进展做一综述，为ISO进一步研究开发提供资料。 ???1　大豆异黄酮的提取方法 ???目前从豆制品等天然产物中提取大豆异黄酮一般是采用甲醇或乙醇浸提，然后用石油醚或正己烷脱脂，丙酮、无水乙醚萃取获得粗提物。采用这些传统方法提取ISO，虽然可操作性较强，但存在的问题很多，如实验步骤较为繁琐、溶剂提取率低、结合型ISO不稳定、不利于ISO的定量分析、ISO得率较低等，因此有必要对传统方法加以改进，主要从增加得率、提高产物纯度、简化操作步骤等方面对ISO 的提取技术做一些研究。 ???1.1　水解法提取　采用水解法是将结合型ISO水解为游离型ISO，这样既有利于分离纯化，也有利于 ISO的检测。汪海波等以脱脂大豆粕为原料，采用酸水解后用无水乙醚萃取的方法提取游离型ISO 成分。实验结果表明，酸水解ISO的提取率和产品纯度均高于常规有机溶剂浸提法；张炳文等通过正交实验确立了糖苷型ISO转化为游离型ISO的最佳酸水解工艺条件：盐酸甲醇溶液的浓度为2 mol/L,水解温度为80℃，水解时间为60 min，水解前后大豆素的含量由0.22%增加至14.01%，染料木素的含量由0.02%增加至23.45%。Liggins 等利用曲霉中产生的水解酶将大豆粉中的结合型ISO水解为游离型ISO，再用乙酸乙酯萃取后，经衍生化反应后，气相色谱质谱联用进行定量，该法不仅效率高，也有利于ISO的定量。 ???1.2　微波萃取　微波萃取（ME）技术是根据物质在微波场中吸收能力差异，使基体物质的某些区域被选择性加热，从而使被萃取物从基体体系中分离，进入微波吸收能力相对差的萃取剂中。张永忠等采用微波处理脱脂豆粕，微波处理4 min时，大豆异黄酮的溶出率显著增加，提取物的纯度也有所提高。Guo等使用微波辅助萃取葛根中大豆苷与大豆素等异黄酮成分，并考察了影响微波萃取的各种因素。结果表明，微波辅助萃取葛根中异黄酮成分仅需要1 min，方法简便易行，提取效率高。 ???1.3　超声提取　超声提取（SE）技术的原理是根据超声具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用，对植物药材的细胞有破坏现象，使其有效成分快速溶于溶媒之中，以利于提取。谢明杰等利用超声提取 ISO，并与加热回流的提取方法进行了比较。结果表明：超声提取30 min所得ISO的提取率比加热回流提取120 min的提取率高约46%，这说明超声提取具有省时、节能、提取率高的优点。潘廖明等比较了醇提法与超声及超声加搅拌辅助提取ISO的效果。正交试验结果显示：当超声频率为25 kHz、超声功率为160 W、60℃超声处理60 min时，大豆异黄酮的得率和含量分别可达4.23 mg/g和2.74%，与醇提法相比分别提高了3.93%和7.87%；采用相同条件下的超声加搅拌（300 r/min）处理，大豆异黄酮得率可达4. 36 mg/g，与单纯超声辅助提取法相比提高了3.07%。AIIaoua等采用溶剂提取法、连续提取和超声提取测定两种大豆产品中ISO的含量，结果显示：连续提取可以使ISO的含量提高，采用超声提取巧min比溶剂连续提取5次可得到更多的ISO。Mauricio等比较了混合搅拌与超声提取大豆异黄酮的效能。在提取溶剂、温度、时间相同的条件下，超声提取糖苷型大豆异黄酮时均比混合搅拌提取具有更高的提取率。以上都说明了超声提取ISO具有快速、高效、操作方便的优点。 ???1.4　超临界流体萃取　超临界流体萃取（SFE）技术是利用溶剂在超临界点附近某区域内，与待分离混合物中的溶质具有异常相平衡行为和传递性能，且对溶质的溶解能力随压力和温度的改变而在某范围内变动，而从