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内分泌疾病实验诊断技术 湘雅三医院内分泌科 莫朝晖 激素测定的技术 甲状腺疾病实验室检查 肾上腺皮质与髓质功能检查 影像学检查 分子生物学技术 激素测定的技术 放射性核素标记 放射免疫分析法RIA 1959年Yalow 免疫放射分析 IRMA 1968年Males 酶免疫分析（EIA） 酶联免疫吸附分析（ELISA）1971年—荷兰学者Weeman 和瑞典学者Engvall 酶联免疫荧光分析法、BAS 等 荧光免疫分析法（FIA）、时间分辩荧光免疫分析法（TRFIA） 发光免疫分析法 化学发光免疫分析法（CLIA） 电化学发光免疫分析法 生物发光免疫分析法 免疫多聚酶联反应（IPCR）等：1992年 灵敏度可达10-21、特异性高 高效液相色谱分析 毛细管电泳法 激素测定的技术 光谱分析技术： 光谱法、紫外光谱法、原子吸收光谱法、荧光光谱法、火焰光谱法、化学、生物发光光谱法 放射受体分析 甲状腺疾病实验室检查 血清甲状腺激素测定TT4、TT3、 FT4和FT3 甲状腺素（T4）全部由甲状腺分泌 三碘甲腺原氨酸（T3）20%直接来自甲状腺,80%在外周组织中由T4经脱碘代谢转化而来 T3是甲状腺激素在组织中的生物活性形式 循环T4约99.98%与特异的血浆蛋白相结合 甲状腺素结合球蛋白（TBG） 60~75% 甲状腺素结合前白蛋白(TBPA) 15~30% 白蛋白(ALB) 10% 游离T4（FT4）仅约0.02% 循环中T3约99.7%特异性与TBG结合 游离T3(FT3）约0.3% 结合型甲状腺激素是激素的贮存和运输形式 游离型甲状腺激素是甲状腺激素的活性部分 直接反映甲状腺功能状态 不受血清TBG浓度变化影响 总T4（TT4）、总T3 （TT3）为结合型与游离型之和。 正常成人血清 TT4水平为64～154 nmol/L（5～12 μg/dl） TT3为1.2～2.9 nmol/L（80～190 ng/dL） 不同实验室及试剂盒略有差异 多采用竞争免疫测定法 趋势 非核素标记（标记物为酶、荧光或化学发光物质） 替代核素标记 正常成人血清 FT4为9～25 pmol/L（0.7～1.9 ng/dL） FT3为2.1～5.4 pmol/L（0.14～0.35ng/dL） 不同方法及实验室差异较大 将游离型激素与结合型激素进行物理分离后 高敏免疫测定被认为是本测定的金标准， 仅少数实验室能完成，一般仅用作制定参考值 目前尚无可行的测定FT4的标准参照方法 目前大多数临床实验室测定FT4和FT3所采用方法 (免疫测定或指数法)并非直接测定游离激素， 测定结果仍受甲状腺激素结合蛋白浓度的影响 称为“游离激素估计值”更为合适 即FT4E和FT3E 蛋白质浓度高时 FT4E过高估计FT4 蛋白质浓度低时 FT4E过低估计FT4 免疫测定中的标记抗体法（labeled antibody methods）是目前FT4和FT3自动化测定中应用最多的方法 在某些情况下（如妊娠时）建议使用 游离T4指数（FT4I）和游离T3指数（FT3I） FT4I=TT4×T3U，FT3I=TT3×T3U T3U为血清T3树脂摄取试验中甲状腺激素结合比值 （Thyroid Hormone Binding Ratio, THBR） *强调各实验室应有自己的正常参考值范围并列于化验单上 应参加全国或相应各省市的中心质控 TT4、TT3 反映甲状腺功能状态最佳指标 甲亢时增高，甲减时降低，一般平行变化 甲亢 TT3增高常较TT4增高出现更早 TT3对轻型甲亢、早期甲亢及甲亢治疗后复发诊断更敏感 T3型甲亢诊断主要依赖于TT3，TT4可不增高 T4型甲亢诊断主要依赖于TT4，TT3可不增高 甲减 TT4降低更明显，早期TT3可正常 许多严重的全身性疾病可有TT3降低 TT4在甲减诊断中起关键作用 凡是能引起血清TBG水平变化的因素均可影响TT4、TT3 测定结果，对TT4的影响较大 使TBG增高而导致TT4和TT3测定结果假性增高的因素： 妊娠、病毒性肝炎、遗传性TBG增多症 某些药物（雌激素、口服避孕药、吩噻嗪、三苯氧胺等） 使TBG降