第一章 色谱发展史.pdfVIP

《色谱分离技术》教案 教学重点：色谱分类及基本术语。 注意事项： 第一章 绪 论 第一节 色谱发展史 1.1.1 色谱方法的问世 俄国植物学家茨维特(Tswett)于1903 年前后在波兰的华沙大学研究植物叶片的组成时， 用白垩土(碳酸钙)作吸附剂，分离植物绿叶的石油醚萃取物得到黄色、绿色和灰黄色彼此分 离的六个色带。其方法是：把干燥的碳酸钙粉末装到一根细长的玻璃管中，然后把植物绿叶 的石油醚萃取液倒到管中的碳酸钙 ，萃取液中的色素就吸附在管内上部的碳酸钙 ，再用 纯净的石油醚洗脱被吸附的色素，于是在管内的碳酸钙上形成三种颜色的六个色带。茨维特 把这样形成的色带叫做“色谱”(Chromatographie)，茨维特用此名于l906 年在德国植物学杂 志上发表。英译名为(Chromatography) ，在这一方法中把玻璃管叫做“色谱柱”，碳酸钙叫做 “固定相”，纯净的石油醚叫做 “流动相”。现在把茨维特开创的方法叫液—固色谱法 (Liquid-Solid Chromatography) 。 1.1.2 色谱的发展简史 在茨维特提出色谱概念后的二十多年无人关注这—“伟大的发明”。直到l931 年德国的 Kuhn 和Lederer 才重复了茨维特的某些实验，用氧化铝和碳酸钙分离了α、β、γ－胡萝 卜素，此后用这种方法分离了六十多种这类色素。Martin 和Synge 在 1940 年提出液－液分 配色谱法(Liquid-Solid Partion Chromatography) ，即固定相是吸附在硅胶 的水，流动相为某 种液体。1941 年他们发表了用气体作流动相的可能性，十一年之后James 和Matin 发表了 从理论到实践比较完整的气－液色谱方法(Gas-Liquid Chromatography) ，因此而获得了1952 年诺贝 化学奖。在此基础 l957 年 Golay 叫开创了开管柱气相色谱法(Open—Tubular Column Chromatography) ，习惯 称 为毛细管柱气相色谱法(Capillary Column Chromatography) 。1956 年Van Deemter 等在前人的基础上发展了描述色谱过程的速率理论。 1965 年Giddings 总结和扩展了前人的色谱理论，为色谱的发展奠定了理论基础。另一方面， 早在1944 年Consden 等就发展了纸色谱，1949 年Macllean 等在氧化铝中加人淀粉粘合剂制 作薄层板使薄层色谱法(TLC)得以实际应用，而在1956 年Stahl 开发出薄层色谱板涂布器之 后，才使得TLC 得到广泛的应用。在 世纪60 年代末把高压泵和化学键合固定相用于液相 色谱，出现了高效液相色谱(HPLC) 。80 年代初毛细管超临界流体色谱(SFL)得到发展，但在 90 年代后未得到较广泛的应用。而在80 年代初由Jorgenson 等集前人经验而发展起来的毛 细管电泳(CZE)，在90 年代得到广泛的发展相应用。同时集HPLC 和CZE 优点的毛细管电 色谱在90 年代后期也受到重视。 对于生物化学家来说，有时更爱使用色谱的别称 “层析”，两者指的是同一技术。 第二节 色谱分析和色谱仪的定义及分类 在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相 （固体或液体）称为固定相 ； 自上而下运动的一相 （一般是气体或液体）称为流动相；装有固定相的管子（玻璃管或不锈 钢管）称为色谱柱。 流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各 组分在性质和结构 的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力 的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 色谱法或色谱分析也称之为色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用混合物 中各物质在两相间分配系数的差别， 两相做相对移动时，各物质在两相间进行多次分配， 从而使各组分得到分离。可完成这种分离的仪器即色谱仪(Chromatograph) 。 色谱分析的分类可按两相的状态及应用领域的不同分为两大类。 1.2.1 按流动相和固定相的状态对色谱分析分类 1 ．气相色谱（GC）又可分为气－固色谱和气－液色谱(GLC)，前者是以气体做流动相、 以固体做固定相的色谱；后者是以气体为流动相．以液体为固定相的色谱 （GSC）。 2