无菌技术措施的选择原则 (1)考虑效果:灭菌的效果比消毒要好 (2)考虑操作对象的承受能力: 接无菌技术措施的选择原则种环或接种针等金属用具一般用灼烧灭菌;培养皿等玻璃器皿用干热灭菌;培养基用高压蒸汽灭菌。操作者双手一般用酒精擦拭,即化学消毒。牛奶用巴氏消毒法。 酒精消毒液中酒精浓度对效果的影响: 70%的酒精杀菌效果最好。原因是浓度过高,菌体表面蛋白质变性过快而凝固成一层保护膜,酒精不能渗入其中;浓度过低,杀菌能力减弱 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)流程:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 (2)应注意的问题 ①全程要求无菌操作,无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物感染。 ②熔化琼脂时,要不断用玻璃棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。熔化后应调节pH后再分装,装入锥形瓶的量以不超过锥形瓶容积的一半为宜。 ③培养基用高压灭菌锅灭菌后,需冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。操作时使锥形瓶的瓶口通过火焰灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 ④平板冷凝后皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高。因此需将平板倒置,这样既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 ⑤在倒平板的过程中,不能将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,因
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