荒漠植物白刺总DNA提取及鉴定.pdfVIP

第 26 卷 　第 3 期 中　国　沙 　漠 Vol . 26 　No . 3 2006 年 5 月 　　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　 May 2006 J OU RN AL O F D ESER T R ESEA RC H 文章编号 : 1000694X (2006) 荒漠植物白刺总 D NA 提取及鉴定 1 ,2 3 ,4 1 1 3 1 ,3 张 勇 , 李 鸣 , 杨同文 , 张腾国 , 陈 拓 , 安黎哲 ( 1. 兰州大学 生命科学学院 , 甘肃 兰州 　730000 ; 2 . 河西学院 生物系 , 甘肃 张掖 　734000 ; 3 . 中国科学院 寒区旱区环境 与工程研究所 , 甘肃 兰州 　730000 ; 4 . 广西壮族自治区甘蔗研究所 , 广西 南宁　530004) 摘 　要 : 荒漠植物白刺含有较多的多糖 、酚类等次生代谢物 ,用常规的 C TAB 、SD S 等方法难 以获得高质量的总 DNA 。针对这一问题探索出一种适合 白刺属植物总 DNA 提取的方法 。其特点是在裂解细胞膜之前 ,首先用无 C TAB 缓冲液进行两次多糖 、酚类等次生代谢物的抽提 ;加大 C TAB 浓度 ,用 3 ×C TAB 作为裂解液 ;在用异丙醇沉 淀 DN A 之前 ,用高浓度 NaCl 再次分离多糖 。用这种方法我们对分布于甘肃的四种 白刺属植物的总 DN A 进行了 提取 ,开展了与总 DN A 相关的 PCR 扩增和其他遗传学分析 ,并取得满意的结果 。 关键词 : 白刺 ; 总 DN A 制备 ; t rn LF 中图分类号 : Q943 文献标识码 : A 　　高质量 DN A 的获得是进行分子生物学研究的 次生代谢物 ,这些物质在用常规方法提取 DN A 的 基础 。植物总 DN A 的提取方法很多 ,但根据细胞 过程中 ,和 DN A 裹挟在一起 ,使 DN A 的提取十分 [4 ] 膜溶涨介质来分 ,可以分为 C TAB 法和 SD S 法 。对 困难 。在前人 工作的基础上 ,通过反复试验 ,我们 于多数植物常规的 C TAB 法[ 1 ] 和 SD S 法[2 ] 可以有 摸索出一种适合 白刺属植物 DN A 提取的方法 ,用 效的提取供下游实验所用的总 DN A 。但对于顽拗 这种方法我们对分布于甘肃的四种 白刺属植物的 植物[ 3 ,4 ] , 由于其细胞结构或者细胞中含有大量的 DN A 进行了提取 ,取得了较为满意的效果 ,提取的 次生代谢物而使 DN A 的提取十分困难[4～9 ] ,这成 DN A 适用于 PCR 扩增和其他遗传学分析 。 为影响此类植物在分子生物学领域进一步研究的瓶 1 　材料与方法 颈 。 ( ) 蒺藜科白刺属 N i