商品化培养液对人类胚胎发育和妊娠结局影响.docVIP

商品化培养液对人类胚胎发育及妊娠结局的影响 　　[摘要] 目的 比较两种商品化序贯培养液Cook和Vitrolife对人类胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。 方法 回顾性分析2014年8月～2015年5月于南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心行体外受精（IVF）或卵胞浆内单精子注射（ICSI）的398例患者的临床资料。根据受精方式与胚胎培养液不同进行分组，IVF周期分为Cook组（n = 103例）和Vitrolife组（n = 196例），ICSI周期分为Cook组（n = 40例）和Vitrolife组（n = 59例）。比较同一受精方式下两种培养液组的受精率、正常受精率、卵裂率、可利用胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚率、临床妊娠率、胚胎种植率和早期流产率。 结果 IVF和ICSI周期中，Cook组受精后第3天可利用胚胎率均显著低于Vitrolife组（31.22%比40.61%，33.43%比42.34%，P 　　[Key words] Embryo； Culture media； Embryonic development； Pregnancy outcome 人类胚胎培养液经历了30多年的发展，如今市场上已出现多种有效的商品化培养液用于胚胎培养。不同品牌的培养液有不同类型及不同浓度的营养成分，同时由于人类配子的稀缺性、珍贵性，商品化培养液的配制更多是基于动物实验结果验证。而人类配子对营养成分的需求和体外微环境的适应性与动物配子又有一定差距[1]，因此不同培养体系可能会对植入前胚胎的发育潜能以及种植能力产生一定影响，进而导致新生儿早产、低体重以及先天性畸形等子代健康问题[2-7]。造成差异的原因尚未明确，如何选择更适用于人类胚胎的商品化培养液已成为很多生殖中心工作人员需要考虑的问题。目前，很少有研究比较这些商品化培养液对种植前人类胚胎的发育潜能及妊娠结局的影响。因此，本研究就Vitrolife和Cook两种商品化培养液对胚胎的发育速度等发育潜能相关指标及妊娠结局的影响进行深入探讨 1 对象与方法 1.1 对象 回顾性分析2014年8月～2015年5月在南京大学医学院附属鼓楼医院（以下简称“我院”）生殖科行常规体外受精（in vitro fertilization，IVF）或卵胞浆内单精子注射（Intracytoplasmic sperm injection，ICSI）治疗并新鲜周期移植的398例患者的临床资料。纳入标准：①女方年龄≤35岁；②不孕年限 0.05）。见表1 2.2 IVF/ICSI周期中Cook与Vitrolife培养液对胚胎发育及妊娠结局的影响 IVF/ICSI周期中，Cook组的第3天可利用胚胎率显著低于Vitrolife组，而囊胚形成率及可利用囊胚率显著高于Vitrolife组，差异均有统计学意义（P 0.05）。见表2 2.3 不同培养液对取卵后第3天胚胎发育速度的影响 对取卵后第3天胚胎的发育速度进行分析（Cook组共1716枚分裂胚，Vitrolife组共2922枚分裂胚）。Cook组5～7个细胞的胚胎所占比例显著高于Vitrolife组，而Vitrolife组8～10细胞的胚胎所占比例显著高于Cook组，差异均有统计学意义（P 0.05）。见表3 3 讨论 国际辅助生殖技术监督委员会（ICMART）和欧洲人类生殖与胚胎学会（ESHRE）的统计数据显示，通过辅助生殖技术受孕的孩子逐年增多，但其安全性还需进一步验证[11-12]。植入前胚胎在体外培养过程中将经历从受精至内细胞团和滋养外胚层等不同细胞谱系的派生等过程，体外培养液可能会导致这些关键性事件发生改变进而可能会影响胚胎的后续发育[13-14]。基于我院中心实验室的培养体系，本研究结果显示：Cook和Vitrolife两种商品化培养液均可获得较为理想的可利用胚胎和妊娠结局，但Cook组的第3天可利用胚胎率显著低于Vitrolife组，而囊胚形成率及可利用囊胚率显著高于Vitrolife组。 　　不同品牌的培养液其营养成分及含量均会有差异，Morbeck等[15]利用小鼠冻融后的一细胞胚胎分别在七种商品化序贯培养液中进行培养，其结果表明：7种培养液的营养成分各有差异，其中Vitrolife培养液的G1和G2中的乳酸含量为10.8和6.0 mmol/L，明显高于Cook培养液（1.8 mmol/L）；Vitrolife分裂期培养液G1不含必需氨基酸，而Cook分裂期培养液CM中含有一定量的必需氨基酸。此外，7种培养基在不同的氧气浓度和蛋白含量下，鼠胚发育速度和囊胚形成率也有差别 本研究结果提示，分裂期培养阶段，Vitrolife培养液优于Cook培养液，而进入囊胚培养阶段，Cook