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以多环芳烃类化合物为例研究化学致癌机制中的遗传损伤机制 06级 四川大学华西公共卫生学院 预防医学三班 杨润芳 0655041055 2010-05-13 肿瘤发生机制 有关研究已证实，由遗传学和表观遗传学改变（即非遗传突变机制）引起的原癌基因的活化和抑癌基因的灭活，从而引起细胞恶性改变是肿瘤发生的核心生物学过程。过去人们普遍认为遗传学上的基因突变是肿瘤发病机制中的关键事件，尤其是抑癌基因的体细胞突变与肿瘤的发生有着密切的关系。但是，近年来随着对肿瘤认识的深人。人们发现DNA序列以外的调控机制即表观遗传学异常在肿瘤的发生、发展过程中也起到非常重要的作用。表观遗传学机制包括：DNA甲基化异常，组蛋白修饰，非编码RNAs(包括microRNA、RNA干扰)，染色质重塑等，而这几个方面都与肿瘤的发生有关。外源性化学物致突变作用是否涉及表观遗传学改变还有待进一步研究。现在比较清楚的还是外源性化学致突变物引起肿瘤的遗传损伤机制学说。 多环芳烃(PAHs)简介 多环芳烃(PAHs)主要来源于有机物的不完全燃烧，在人类的生产和生活活动过程中很容易产生。PAHs进入人体后，大部分经混合功能氧化酶代谢生成各种中间产物和终产物，其中一些代谢产物可与DNA共价结合形成PAH—DNA加合物，引起DNA损伤，诱导基因突变，甚至诱发肿瘤形成。很多流行学调查和动物实验表明，PAHs可诱发皮肤、肺、肝、阴囊等部位癌症。 苯并芘（BaP）是多环芳烃(PAHs)代表物 有我国学者在体内染毒条件下，运用彗星试验观察BaP对小鼠肺细胞DNA损伤的影响。结合其他学者研究认为BaP是一种前致癌物，需在体内经代谢活化后转变成终致癌物才具有致突变和致癌作用。其引起DNA损伤的机制可能为：BaP进入体内后，大部分在肝、肺细胞微粒体中细胞色素P450酶系(如CYPIA1)的氧化作用下形成环氧化物．然后经EH水解成二羟基化合物。再由P450酶系二次环氧化生成二羟基环氧化物，此为终致癌物，可与靶细胞DNA结合，形成DNA加合物，从而引起DNA损伤，启动致突变／致癌过程。 BaP在体内P450酶系的作用下可产生1O余种代谢产物，现认为反BPDE(anti—BPDE)是BaP代谢的终致癌物，其带有亲电子基团，可与细胞大分子DNA中的亲核基团鸟嘌呤的外环胺基端结合。还可与转录因子结合，从而损伤DNA．主要引起G-T、G-A突变，这在化学诱变和致癌作用中一直被认为是一种关键因素，进而激活原癌基因或使抑癌基因失活，启动致突变／致癌过程。 其他学者也做了相关研究，总结见下： （一）PAH—DNA（DNA加合物）对原癌基因Ras和抑癌基因p53的影响：PAHs进人人体后经CYP450s中CYP4501A1代谢活化生成具有强致癌活性的亲电子环氧化物，后者可与靶细胞DNA形成PAH—DNA加合物，造成DNA损伤和染色体畸变，引起原癌基因ras和抑癌基因p53的改变。 （二）PAHs对代谢酶活性直接作用及在基因水平上的影响。包括CYP450s的CYP4501A1 、GST 、环氧化物水解酶 (EH) 及遗传多态性。 原癌基因 在正常情况下，原癌基因处于抑制状态，表达水平较低，但却是正常细胞生长、增殖必不可少的。在某些致癌因子的影响下，原癌基因的结构会发生点突变、插入、重排或缺失及扩增等，改变了其转录的活性，使之从抑制状态转变成激活状态成为癌基因，这样正常细胞就会发生癌变。 肿瘤抑癌基因(tumor suppressor gene) 是细胞的制动器．它们编码的蛋白质抑制细胞的增殖，促进细胞的分化、成熟和衰老，引导多余的细胞进入程序化死亡途径，并阻止细胞癌变。正常的二倍体细胞中．每种肿瘤抑制基因都有两个拷贝。只有当两个拷贝都丢失了或失活了才会失去增殖的控制，使细胞周期不能得到正常调节。肿瘤抑制基因．如p53基因、PRB、WT1、p15、p16和p21等蛋白质分子，如果发生基因突变，则失去了细胞周期素、CDK及其复合物蛋白酶活性的正常调节，从而与肿瘤的发生具有一定的关系。 1）PAHs对原癌基因Ras的影响： PAHs可以引起原癌基因ras的点突变，使之激活。 有实验证明，经PAHs处理的妊娠Balb／c小鼠，其后代Ki-ras基因呈现高突变率。外国学者Mizesko等研究发现早期暴露于甲基胆蒽诱导的Ki-ras基因突变的类型可能影响肺肿瘤的进展。Ras基因的激活常常发生在癌变的早期，其表达产物～血清P21蛋白是鉴别恶性肿瘤的生物学标志物。 有研究表明，用药物遗传学小鼠模型评价子宫暴露于PAHs、3-甲基胆蒽时，发现CYP4501A1在调控原癌基因和肿瘤抑制因子基因表达中有损害作用。Marshall等通过分析仔鼠的石腊包埋肝组织中溶胞产物中的Ha-ras、p53基因，筛选