第六章 质谱技与质谱仪2.pptVIP

样品含盐量低 * 质量范围: 分子量小于500,000 Da * 碰撞诱导分解在碰撞室内进行,带有一 定.能量的离子进入碰撞室后,与室内惰 性气体的分子或原子(也可以是空气) 发生碰撞,离子发生碎裂. * 利用软电离技术(如ESI, MALDI和FAB)作为离子源时，所得到的质谱主要是准分子离子峰，碎片离子很少，因而也就没有结构信息。为了得到更多的信息，最好的办法是把准分子离子“打碎”之后测定其碎片离子。 * 子离子扫描常用于MRM方法开发，寻找最强碎片离子，并确定其最佳碰撞能量及相关质谱参数 –母离子扫描、中性丢失扫描可用来研究结构相似性化合物（如具有相同结构碎片、或相同结构基团的化合物） * 生物质谱在蛋白质和多肽研究中的应用 1.相对分子质量测定 2.肽谱测定 3.肽序列测定 4.蛋白质翻译后修饰 1.相对分子质量测定 MALDI-TOF的准确度高达0.1%~0.01%，远远高于目前常规应用的SDS电泳与高效凝胶色谱技术，目前可测定生物大分子的分子量高达600KDa。 SARS病毒N蛋白整体分子量 2.肽谱测定 肽质量指纹谱（Peptide Mass Fingerprinting, PMF）是蛋白质被识别特异酶切位点的蛋白酶水解后得到的肽片段的质量图谱。采用MALDI-TOF-MS测得。由于每种蛋白的氨基酸序列（一级结构）都不同，当蛋白被水解后，产生的肽片段序列也各不相同，