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土壤中分解尿素细菌的分离与计数要点
专题2 微生物的培养与应用 温故知新 二、重难点突破(合作探究) * 课题2 土壤中分解尿素的细菌的 分离和计数 1.实验室中微生物的筛选应用了什么原理?是怎样实现的? 2.测定微生物数量的方法有哪些?各有什么优缺点? 学习目标: 能建立实验设计的流程; 学会在实验设计中体现重复组、对照组,并体会其在实验设计中的重要作用; 学习重点、难点: 在实验设计中正确的设置重复组和对照组 一、 基础知识梳理(实验设计) 1.根据实验目的,参考P23图2-7,请思考基本的实验流程(步骤)是怎样的? 2.土壤中主要的微生物有哪些?应如何取样? 3、配制培养基的一般步骤有哪些? 4、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度? 5、培养不同的微生物需要注意什么?为什么每隔 24h统计一次菌落数目? 6、怎样计算每克土壤样品中的菌株数? 在实验设计中如何设置重复组和对照组 设:经过前期的预实验,在尿素分解菌分离实验中我们确定的稀释度为104,105,106,请思考以下问题 1.稀释后的样品溶液应该涂布在什么培养基上?应该涂布几个? 2.假设在三个稀释度下,平板上的菌落数目统计情况如下,请说明每克样品中菌株数目的计算方法? 25 198 310 32 86 250 21 202 242 106 105 104 3.如何证明选择培养基有选择作用? 对照组如何设置? 4.在将牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组后,是否能完全排除其他非测试因素对实验结果的影响? 土壤中分解尿素细菌的分离与计数的实验设计 实验流程 土壤取样 制备培养基 稀释涂布 培养 计数 重复组和对照组的设置 104 105 106 重复组(实验组) 条件对照组 空白对照组 104 105 106 小结: 1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水 C.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水 D.KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、 水; 2.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是 ( ) A.2.34×108 B.2.34×109 C.234 D.23.4 当堂检测 A B 3.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中,正确的是 (??)? ①土壤取样??②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中??③吸取0.1mL进行平板涂布?④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度? A.①→②→③→④????B.①→③→②→④???? C.①→②→④→③????D.①→④→②→③ 4.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,其原因是(??)? A.细菌个体小,真菌个体大??? B.细菌易稀释,真菌不易稀释? C.细菌在土壤中数量比真菌多??D.随机的,没有原因? C C 5. 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( ) A.未接种的选择培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 C.接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 D.接种了的选择培养基 ? C
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