林31选修3.2.2.2动物细胞工程.ppt

一、动物细胞培养 1.概念与操作流程 胶原蛋白酶 幼龄动物 2.条件 (1)无菌、无毒：对_____________________无菌处理，添加 _______，定期更换培养液以清除代谢产物。 (2)营养：除正常的有机和无机营养外，加入____________。 (3)适宜的温度和pH：温度为_____________(哺乳动物)，pH 为__________。 (4)气体环境：含____的空气加_______的混合气体。 培养液和所有培养用具 抗生素 血清、血浆 36.5±0.5 ℃ 7.2～7.4 95% 5%CO2 （１）大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品 （疫苗、干扰素、单克隆抗体等）。 （5）解决为大面积烧伤病人移植皮肤问题。 　　（利用贴壁生长和接触抑制原理） （３）检测有关物质毒性(实验设计，镜检看细胞或染色体变异多少)。 （４）细胞的生理、药理、病理研究 （如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供依据） （2）为基因工程技术提供受体细胞. 3.应用：生物制品的生产、检测_________、医学研究。 有毒物质 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物核移植概念 是将动物的一个细胞的_______移入一个_______________中， 使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育为___ _______。如克隆动物 细胞核 去核的卵母细胞 动 物个体 2.原理 细胞核的全能性 克隆个体：多利 克隆细胞：细胞培养 克隆分子：PCR 3.类型 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 细胞分化程度低，恢复全能性容易 4.例：多莉羊/高产奶牛的克隆---无性生殖 体细胞核移植过程流程图：高产奶牛的克隆过程 受体细胞的遗传物质尽量去掉或者破坏 体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件 10代以内 2.动物细胞核移植过程 供体体细胞 细胞培养 供体细胞核 ?重组细胞 ?卵巢卵 母细胞 去核 无核卵母细胞 ?胚胎 ?代孕母体 生出与供体遗传物质 ?基本相同的个体 ?注 人 减Ⅱ ?中期 发育 ?胚胎移植 ?细胞 融合 囊胚或桑椹胚 技术手段？ 两大阶段：核移植、胚胎移植 动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等 3.应用 (1)加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。 (2)保护_________。 (3)生产医用蛋白:转基因，生物反应器 (4)作为异种移植的_____。 (5)用于组织器官的_____。 【点拨】核移植过程中供体理论上是提供细胞核，但操作过程中可以把整个体细胞注入去核的卵母细胞中去，原因是体细胞体积相对较小，取核难度较大，另外细胞膜对核融合的障碍性较小。 濒危物种 供体 移植 植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较 植物组织培养 动物细胞培养 核移植 结 果 关 键 环 节 与外植体完全相同的个体 相同分化程度的细 胞群 与供体基本相同的 个体 细胞的脱分化、再分化、 分化 细胞分化、细胞癌变 核融合、细胞分化 【高考警示钟】圈红字 1.植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞可以不分化只分裂。 2.区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始了传代培养。 3.植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相同，也有部分性状与受体相同。 三、动物细胞融合与单克隆抗体 1.动物细胞融合 (1)概念：指两个或多个动物细胞结合形成_________的过程。 (2)融合方法：_____________、___________、电激等。 (3)意义：突破了______________的局限,使_________成为可 能，也为制造____________开辟了新途径。 一个细胞 聚乙二醇(PEG) 灭活的病毒 有性杂交方法 远缘杂交 单克隆抗体 原理：细胞膜的流动性 1、为什么选用小鼠骨髓细胞与B淋巴细胞融合？ 2、骨髓瘤细胞是癌细胞吗？ 3、整个制备过程经过哪两次筛选？ 4、杂交瘤细胞在小鼠的腹腔内培养与在体外培养有何区别？ 5、杂交瘤细胞在小鼠的腹腔内是否会造成小鼠死亡？ 6、小鼠单克隆抗体能否用于人体疾病的治疗？ 什么是单克隆抗体？制备过程中应该注意的问题（P53阅读） 单克隆抗体的制备（补充） （灭活的仙台病毒，PEG） (可产生某种抗体) （第一次筛选：具双亲细胞遗传物质的杂交瘤细胞） 细胞融合 细胞培养 提取 (第二次筛选：能无限增值和产生抗体) (某种) 2.单克隆抗体 (1)制备 (2)优点：特异性强、______