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实验四槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识 （一）实验原理 由槐花米中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制，或根据芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游离析出。 （二）芸香苷的提取 方法Ⅱ ：碱溶酸沉法 （三）芸香苷的精制 （四）芸香苷的水解 注：抽滤瓶的使用： ①开始顺序：减滤纸（大小应合适）→安装分液漏斗（分液漏斗下斜口应对准抽气口）→连接真空泵→打开真空泵→抽滤。 ②结束时顺序：先拔掉抽滤瓶上与真空泵连接的像皮管，再拆除装置。否则真空泵中的水回因为压力较抽滤瓶中空气的压力大而流入抽滤瓶。 （五）芸香苷、槲皮素及糖的检识 实验名称 实验试剂 现象 芸香苷 槲皮素 Molish反应 10%α-萘酚乙醇 紫色环 无现象 溶液-浓硫酸 盐酸-镁粉反应 盐酸-镁粉 红色～紫红色 醋酸镁反应 1％醋酸镁甲醇 黄色荧光（紫外灯） 溶液（滤纸） 三氯化铝反应 1％三氯化铝乙 黄色荧光 醇溶液（紫外灯） 锆-柠檬酸反应 2％二氯氧锆甲醇溶液 黄色并 黄色 2％柠檬酸甲醇溶液3～4滴 褪色 不褪色 （六）注意事项 1．在提取前应将槐花米略捣碎，使芸香苷易于被热水溶出。 2．在提取过程中，加入硼砂的目的是使其与芸香苷分子中的邻二酚羟基发生络合，既保护了邻二酚羟基不被氧化破坏，又避免了邻二酚羟基与钙离子络合（芸香苷的钙络合物不溶于水），使芸香苷不受损失，提高收得率。 3．本实验直接用沸水由槐花米中提取芸香苷，收得率稳定，且操作简便。如用碱溶酸沉法提取，加入石灰乳可以达到碱性溶解的目的，又可除去槐花7米中所含的大量粘液质，但应严格控制其碱性pH8～9，不可超过pH10。如pH值过高，加热提取过程中芸香苷可被水解破坏，降低收得率。加酸沉淀时，控制pH3～4,不宜过低，否则芸香苷可生成yang盐而溶于水，也降低收得率。 * * 方法Ⅰ：水提取法 槐花米粗粉20g 加10倍量沸水煮沸20min，反复2次，趁热脱脂棉滤过 药渣 滤液 静置过夜，滤过 滤液 芸香苷粗品 槐花米粗粉20g 加0.4％硼砂水200ml，石灰乳调pH8～9 煮沸20min，4层纱布滤过，反复2次 滤液 药渣 放冷至60～70℃，浓盐酸调pH3～4，冰箱中析晶，滤过 滤液 沉淀 室温下晾干 芸香苷粗品 芸香苷粗品2g 加蒸馏水400ml，煮沸溶解10min趁热抽滤 滤液 药渣 滤液 静置析晶，抽滤 结晶 精制芸香苷 室温下晾干 槲皮素精制品 精制芸香苷 加2％硫酸100ml，加热回流30min，至沉淀不再增加为止，放冷抽滤 沉淀 滤液 用少量水洗去余酸，晾干 加氢氧化钡中和至中性，滤过 槲皮素粗品 硫酸钡沉淀 滤液 95％乙醇 重结晶 浓缩至干，加2～3ml乙醇溶解 糖供试液