牦牛β-乳球蛋白分离纯化及在不同pH值温度的变性研究.pdfVIP

vnⅣw ．chinadairy．net 中国乳品工业 zgrpgy@163．com dqiryINDUSTRY 牦牛fl-~L球蛋白分离纯化及在 pH值温度的变性研究 王立枫，马莺，李琳，崔杰 (哈 尔滨工业大学 化工学院，哈 尔滨 150090) 摘 要：通过采用反向液相色谱(Rp—HPLC)对不同方法分离乳清蛋白的结果进行分析，同时检测分离纯化的牦牛JB一乳球蛋白进行， 其蛋 白纯度达到90％以上。另外使用非变性凝胶 电泳(Native—PAGE)对不同pH值、不同加热温度条件下牦牛 一乳球蛋白的变性条 件及变性进行了研究。结果表 明，牦牛3／一乳球蛋白的变性温度在80℃左右。蛋白变性含量随着加热温度和pH值的增加成上升趋 势。加热至90℃后蛋白变性质量分数增加显著在pH6和pH9条件下未变性蛋白质量分数分别为24％和9％。 关键词：牦牛 一乳球蛋白；乳清蛋白；热处理；蛋白变性 中图分类号：TS252．1 文献标识码：A 文章编号：1001—2230(2016)08—0017—04 ResearchofseparateYakJB—LactoglobulinanddenaturationatdifferentpH and heatingtem perature WANGLi—feng，MAYing，LILin，CUIJie (ChemicalEngineeringandTechnology，HarbinInstituteofTechnoloyg ，Harbin150090，China) Abstract：Yakwheyprotein obtainedbydifferentmethodsanalyzedbyRP—HPLC．Thepuffy ofseparation 8一lactoglobulinwasmore than90％．UsmgNative—PAGEtodetectedtheconditionandcontentofyakp—lactoglobulindenaturationatdifferentpH (6．0to9．0)and heatingtemperature(60to90℃)．Theresultsshownthatthedenaturationofp—lactoglobulinwasabout80oC，andthecontentofdenautr- ationJB—lactoglobulinwasnicreased thpH andheatingtemperautreincreased．Wihtheatingtemperautreto90℃ ，thecontentofnative p—lactoglobulinwas24％nad9％atpH6．0andpH9．0respectively． Keywords：yka IB—lactoglobulin；wheyprotein；heat—treatment；proteindenaturation 叠氮化钠并在-18℃冷冻 ，并迅速送 回实验室进行牦 0 引 言 牛乳乳清蛋 白分离实验 。 牦牛生活在海拔 3000m 以上 的青藏高原 ，生存 1．2 仪器设备 环境相 当极端包括低温 、低压 、缺氧 、紫外照射强等特 Agilent1100高效液相色谱仪 ，全谱直读 电感耦合 点。中国牦牛数量达到 1500万头左右总量 占全世界 等离 子 器 ，离子 色谱 仪 (ICS一3000)，离心 机 ，Sigma 90％以上 。中国牦牛数量持续增长 ，仅在水牛和黄牛 3-30K台式 高速 低 温离 心机 ，超滤 机 ；美 国密 理博 之后排第三位 一31。 Millipore超滤系统 ，电泳仪 (Bio-Rad165-3361)。 牦牛乳清蛋 白的总质量分数 占蛋 白总质量分数