遗传学第七章2012.pptVIP

因为链霉素处理A菌株时，可以阻止细菌的细胞分裂，但并不立即杀死细菌，还可以使交配持续一定的时间，交配后A菌株被杀死，并不影响重组；处理B菌株时，虽然交配也能进行，但交配后B菌株被杀死，所以后代不能形成，重组也不能发生，因而认为这个重组，遗传物质不是相互交流，而是单方向转移，即A菌株的遗传物质转向B菌株，B菌株的遗传物质不能转向A菌株， A为供体，相当于高等生物的“雄性”， B为受体，相当于高等生物的“雌性”。 F因子在游离状态时可以单独复制，整合到染色体上以后就失去了单独复制的能力。接合时，整合到染色体上的F因子首先活跃起来，在它的一条链中切开缺口，并同时进行滚环式复制，借助于DNA滚环复制的动力，带切口的链从5`端进入接合管，这种转移和F＋向F－转移相似，所不同的是F因子和染色体DNA链相连，染色体也随着F因子的转移而被带入到受体细胞，转移的链进入受体细胞立即按照5`→3`的方向进行复制。 其它营养物质和抗性基因的鉴定方法相同，每隔一定的时间取一次样，记录每个基因进入受体的时间。（见P165，表7-5） 四、转导（transduction） 转导：以噬菌体为媒介，将供体DNA片段转移给受体细胞， 使其遗传组成发生相应变化的过程。 （一）转导的发现 为了验证沙门氏菌中是否也存在类似于E. Coli的接合现 象，1952年Lederberg和他的学生Zinder进行了下列杂交试验： 3、被证明为是P22-phage 在“U”型管的两个臂中加P22抗血清蛋白，发现这种因子可以被P22抗血清蛋白灭活，进一步研究证明FA的大小和质量也与P22-phage相同，因而认为FA就是 P22-phage， P22-phage是一温和性，经诱导可已成为烈性的，也就是说P22的遗传信息可以整合到宿主的染色体上，也可以转移遗传物质， P22-phage充当了传递遗传物质的介体。 这种现象称为转导。 如果两个基因的距离大于phage DNA的长度，一般不能同时转导，除非两个phage同时侵染，又同时将这两个基因转导进受体重组，这种机会是极小的，几乎是不可能的。所以如果两个基因被转导，则证明这两个基因距离较近，愈近共同转导的机会愈大。 这种现象称 共转导或并发转导、合转导（cotransduction） 正因为如此，转导也曾广泛用于染色体作图。 如同时观察3个基因转导，则只要做一次实验就可以推出3个基因的次序。 例： 供体E. Coli基因型为a＋b＋c＋ 受体 基因型为a－b－c－ 供体用P1-phage侵染，再用其phage后代侵染受体细胞，然后把受体细胞接种在选择培养基上，如先选择a＋基因，在选择培养基上加上b＋c＋两种质，不加a＋的物质，若能生长，则证明a－发生了变化，再用此培养基上的细胞分别接种在b＋基因或c基因的选择培养基上，若仍能生长，则说明发生了共转化。 （五）重组作图 用时间作图法有一定的问题，如果两个基因间的距离小于2min，就不可靠。应采用传统的作图法，如两个基因紧密连锁：lac＋（乳糖发酵）和ade－（腺嘌呤缺陷），如求得这两个基因的距离 将Hfr：lac＋ade＋×F－：lac－ade－ 因为lac距原点近（时间作图法可以证明）， 只要ade基因进入受体， lac基因肯定也进了 受体细胞，所以用完全培养基不加嘌呤的选 择培养基，鉴定不同的基因型及其相应频 率，如果是ade＋，同时又是lac ＋ ， 没有交 换，如果是ade＋及ade－ ，则发生了交换， 即可以计算出lac－ade间的重组值。 RF=