寿胎丸对SD孕鼠生殖功能及其胚胎发育的毒性研究_0.docVIP

寿胎丸对SD孕鼠生殖功能及其胚胎发育的毒性研究_0.doc

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寿胎丸对SD孕鼠生殖功能及其胚胎发育的毒性研究 作者:刘丹卓,尤昭玲,赵新广 【摘要】 目的 观察寿胎丸对SD孕鼠生殖功能及胚胎发育的毒性。 方法 将孕鼠随机分成5组,即溶剂对照组、寿胎丸高剂量组(简称高剂量组)、寿胎丸中剂量组(简称中剂量组)、寿胎丸低剂量组(简称低剂量组)、阳性对照组。寿胎丸高、中、低剂量组采用灌胃给药。观察孕鼠增重、摄食量、交配率、受孕率等,并观察吸收胎、畸胎等异常状况。结果 寿胎丸不同剂量对孕鼠生殖功能状态、胎仔活胎率、吸收胎率和畸胎率的 影响 ,与溶剂对照组比较差异均无统计意义。结论 寿胎丸药液在本 研究 所确定的 50 g/kg质量浓度以下,初步认为对健康育龄SD孕鼠生殖功能及其胚胎发育最大无损害效应水平为 50 g/kg。 【关键词】 寿胎丸;生殖毒性;安全性 寿胎丸乃清代盐山名医张锡纯所创,出自《医学衷中参西录》,原为护胎而设,后经多年来临床医家们反复实践与锤炼,已成为 治疗 胎漏、胎动不安、自发流产、滑胎的首选方。寿胎丸广泛用于妊娠期,其药效已得到了充分肯定,但临床运用安全性研究至今未见详细报道。有效评价药物对女性生殖功能的影响有着深远的意义,女性生殖系统是药物作用的一个特有的靶器官,女性生殖系统复杂且所有配子在出生前就已形成,所以其损害可能是多靶点及永久性的,并可导致完全绝育[1]。有鉴于此,本实验通过其不同剂量寿胎丸对SD孕鼠体内染毒,进行生殖毒性测定,以期获得其继药效学之后的临床前毒效学资料,为其孕期合理和安全 应用 提供实验依据。 1材料与方法 1.1 材料 1.1.1药液制备 对所需中药药材的来源及品种进行鉴定,筛选优质正品,原料经品种鉴定无误后,再进行挑选和洗净,然后炮制、切片、烘干、粉碎。严格按照经典处方比例用量配备,制取工艺如下:取经加工炮制的标准中药饮片(菟丝子、续断、桑寄生)加蒸馏水6~8倍量,煎煮2次,每次1.5 h,合并滤液,浓缩至相对密度为1.1~1.2(50 ~60 );加入乙醇使醇含量达65 %,冷藏24 h,醇液滤过,滤液回收乙醇,至无醇味;阿胶烊化;以上两液合并,滤过;滤液冷藏放置,视无沉淀析出;添加蒸馏水,调pH值至6.5~7.0,并调整至相当于含生药2 g/mL;精滤、灌封、灭菌。 1.1.2主要试剂与仪器 40 %甲醛,北京化学试剂公司生产;冰乙酸,北京化学试剂公司生产;95 %乙醇,北京化学试剂公司生产;丙三醇,北京化学试剂公司生产。光学显微镜:日本OLYMMPUS SZ-ST型。 电子 分析 天平:美国AG-104,感量值0.01 g。游标卡尺:天津仪器厂生产。 1.1.3实验动物 取经检疫1周的健康性成熟未经交配生育的Sprague|Dawley SPF/VAF级大鼠,雌雄各150只。年龄约 80~90 d,体质量约200~220 g(♀),350~380 g(♂)。以上动物由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物合格证号:SCXK(京)2007-0001。使用北京科澳协力饲料有限公司生产的标准膨化饲料在标准饲养盒内喂养,饲料合格证号:SCXK(京)2005-0007。每盒5只,盒内保持清洁干燥,定时定量向饲料盒添加足量饲料,由动物自由摄食。饮水采用经DWT型二氧化氯消毒机处理后聚乙烯塑料瓶装消毒饮用水,由动物自由饮用。每日清洗饮水瓶,并更换饮用水1次。SPF级动物房日光灯明暗交替12 h,室温22 ~25 ,湿度30 %~70 %。 1.2方法 1.2.1实验分组 采用交配后动物分组法:将当日已交配受精鼠称重,按体质量排序,以每组5只(1盒)将受精鼠按体质量依溶剂对照组、寿胎丸低剂量组(简称低剂量组)、寿胎丸中剂量组(简称中剂量组)、寿胎丸高剂量组(简称高剂量组)、阳性对照组(环磷酰胺组,代号CP)顺序随机分配,并尽量使各组受精鼠数相近。次日交配受精雌鼠再按体质量编号依次随机分配到前一日未分配组别或下一轮次组别中。交配结束前少量受精鼠再按体质量编号依次补充至受精雌鼠数较少的组别中,使各组受精鼠总数相近。最终各实验组分组只数见表1。 1.2.2给药方法 各剂量组大鼠分上下午2次固定时间灌胃给药,与人临床拟用途径相同,给药剂量见各表,高剂量相当于人临床用量的200倍。于妊娠期第6 d开始给药,连续给药10 d。给药期间依体质量变化随时调整给药体积。溶剂对照组:同期灌胃蒸馏水,给药体积设计与各剂量组给药体积相当,并依体质量变化随时调整给药体积。阳性对照组:采用腹腔注射给药,给药期限从妊娠第11 d至妊娠第13 d,给药剂量7 mg/(kg·d)。 1.2.3动物体征观察及体质量、摄食量测定 给药期间每3天称1次体质量,并计数。给药日起至处死日每日上下午观察大鼠各1次,记录动物外观、行为或异常体

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