榛花对四氧嘧啶性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响_0.docVIP

榛花对四氧嘧啶性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响 作者：蔡英兰，金香子，朴丽花，李相伍 【摘要】 ［目的］ 观察榛花对糖尿病小鼠肝糖原含量的 影响 . ［ 方法 ］ 用四氧嘧啶制作小鼠糖尿病模型，共设6个组，即正常对照组、糖尿病对照组、药物对照组及大、中、小剂量实验组（榛花浓缩液5.00，2.50，1.25mL/kg），实验周期为3周，采用组织化学方法显示肝糖原. ［结果］ 大、中、小剂量榛花浓缩液实验组肝糖原含量明显增多. ［结论］ 榛花可促进肝组织糖原合成. 【关键词】 糖尿病，实验性;肝糖原;植物，药用;小鼠 榛花具有降低血糖作用， 目前 已被证实的降低血糖作用机制有促进胰岛B细胞的分泌功能，提高血清胰岛素水平;作用于受体或受体后水平，增加胰岛素受体数目或提高亲合力;抑制胰高血糖素分泌;促进周围组织及靶器官对糖的利用;清除自由基及抗脂质过氧化等 ［1，2］ .前期实验结果表明，榛花具有清除自由基及抗脂质过氧化作用，而对受损胰岛B细胞的再生和修复作用不明显.本实验通过组织化学方法观察了榛花对糖尿病小鼠肝糖原含量的影响，为探讨榛花的降低血糖机制提供实验依据. 1 材料 1.1 实验动物 取昆明种雄性小鼠，体重为（20±2）g，由延边大学医学部实验动物科提供. 1.2 药品与试剂 榛花采集于长白山地区，采用水提取法提取，具体方法为取榛花780g，加蒸馏水1500mL煮沸30min～1h，过滤后浓缩至200mL，灌封备用.盐酸二甲双胍片为贵州圣济堂制药有限公司产品，批号四氧嘧啶为香港FARCO化学供应公司产品. 1.3 仪器 LEica820型组织切片机为德国产，OLYMPUS VANOX型万能显微镜为日本产，TD-2000型真彩病理细胞显微 分析 系统为北京天地百年 科技 有限责任公司产品. 2 方法 2.1 四氧嘧啶性糖尿病小鼠模型的制作 取雄性小鼠，先适应性喂养1周，禁食24h，自由饮水.将四氧嘧啶用生理盐水配制成7g/L注射液，每只小鼠按70mg/kg剂量尾静脉1次性注射给药.注射后第5日测定空腹血糖，将空腹血糖值大于10.00mmol/L 者判定为糖尿病模型制作成功 ［3，4］ . 2.2 分组及处理 取正常小鼠10只为正常对照组，取糖尿病小鼠50只，随机分为5个组，分别为糖尿病对照组、药物对照组及榛花大、中、小剂量实验组.实验期间各组小鼠均给予块料喂养，大、中、小剂量实验组每日分别灌服给予榛花浓缩液5.00，2.50，1.25mL/kg;药物对照组每日灌服给予盐酸二甲双胍1g/kg;糖尿病对照组和正常对照组每日灌服给予相应体积的蒸馏水.实验周期为3周. 2.3 组织化学观察 实验周期结束后将小鼠脱颈处死，迅速剖取肝脏，将肝组织在4Carnoy氏液中低温固定6～8h，经乙醇梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切成5μm切片，行碘酸雪夫氏（PAS）反应显示肝糖原 ［5］ .对照实验:用唾液消化肝组织中的糖原后再行PAS反应.染色后在显微镜下观察并 拍片，并利用病理显微 分析 系统进行定量分析，每组 随机选择5张标本，每张标本中再随机选择3个视野，在400倍显微镜下测定每个视野的糖原颗粒面积百分比. 2.4 数据处理 应用 SPSS10.0统计软件进行方差分析. 3 结果 肝糖原经PAS反应染色后，在光学显微镜下呈紫红色颗粒.正常对照组肝糖原颗粒含量丰富，染色深（图1）;糖尿病对照组肝细胞糖原颗粒含量明显减少，染色浅（图2）;药物对照组与大、中、小剂量实验组肝细胞糖原颗粒含量明显增多，染色较深（图3～图6），其中以大剂量实验组的变化最为明显，接近正常对照组.肝糖原定量统计分析结果表明，大、中、小剂量实验组肝糖原面积百分比与糖尿病对照组比较明显升高，有显著性差异（P0.01，表1）. 表1 肝糖原定量分析结果 4 讨论 肝脏是糖代谢的主要器官，主要通过促进糖原合成、葡萄糖利用及抑制糖异生等途径使血糖降低，而肝脏的糖代谢主要是在胰岛素的诱导下完成的.四氧嘧啶性糖尿病小鼠体内胰岛素水平明显下降，肝脏糖代谢出现紊乱，糖原合成降低，葡萄糖利用减少，糖异生加强，导致血糖升高.本实验组织化学染色结果表明，糖尿病对照组小鼠肝细胞内糖原颗粒含量明显减少，着色浅，提示糖尿病小鼠肝细胞合成糖原功能明显减弱，与 文献 报道相符 ［6］ .3周实验周期后，药物对照组及大、中、小剂量实验组肝糖原含量与糖尿病对照组相比较明显增多，着色也较深，其中大剂量实验组变化最为明显，接近于正常对照组， 提示榛花能够改善糖尿病小鼠肝内糖代谢紊乱，增强肝细胞合成糖原的功能，从而降低血糖. 【 参考 文献】 ［1］ 林兰，魏军平.中西医结合防治糖尿病回顾与展望［J］.医学 研究 通讯， 2