正交实验优选鱼腥草总黄酮提取工艺研究.docVIP

正交实验优选鱼腥草总黄酮提取工艺研究 【摘要】 目的优选鱼腥草总黄酮的最佳提取工艺条件。方法以芦丁、出膏率为评价指标，采用正交实验法对鱼腥草总黄酮的提取工艺进行优选。结果最佳提取工艺条件为用12倍量碱性（5%NaOH）稀乙醇(60%) 液提取3次，80 min/次。结论优选出的工艺 科学 合理。 【关键词】 鱼腥草； 总黄酮； 正交实验法 Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction procedure of Houttuynia flavonoids. MethodsThe orthogonal test was used to optimize extraction process of Houttuynia with Rutin and the rate of paste as indexes. ResultsThe optimum extraction procedure was as follows: herbs water decocted with 12 times water, decocted three times, and 80 minute each time. ConclusionThe optimum extraction procedure is scientific,reasonable and stable. Key words：Houttuynia cordata Thunb.； Flavonoids; Orthogonal test 鱼腥草为三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb的地上部分,性辛、凉，气腥。它的主要有效成分是黄酮和挥发油，具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋之功效，对尿道疾病、胃病、各种化脓性疾病、子宫肌瘤等也有疗效,外用可治疥癣、湿疹、痔疮等。本实验以出膏率、芦丁为考察指标，对鱼腥草黄酮提取工艺进行考察。 1 仪器与试药 752型紫外分光光度计（上海惠普分析仪器有限公司），芦丁（ 中国 药品生物制品检定所，供含量测定用，批号100080-200306），水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 正交实验设计根据鱼腥草黄酮的理化性质，以及大生产中的可行性原则（减少工序，降低成本），选取加溶剂量、提取时间、提取温度、溶剂浓度（溶剂为5%NaOH稀乙醇液）为考察因素，进行L9（34）正交实验，并以出膏率、芦丁的含量为评价指标，优选最佳工艺。因素水平见表1，实验设计结果见表2，方差分析见表3。 2.2 UV法测定总黄酮的含量［1］ 2.2.1 标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的芦丁标准品13 mg于100 ml容量瓶中,加甲醇溶解,定容,摇匀即得0. 13 mg/ml芦丁标准品溶液。精密吸取上述标准品溶液(0, 1.0, 2.0,3.0, 4. 0, 5. 0, 6. 0)ml分别置于25 ml容量瓶中,各加水6. 0, 5. 0, 4. 0, 3. 0, 2. 0, 1. 0, 0 ml,再加0. 7 mol/L亚硝酸钠溶液1 ml,摇匀,静置6min,加0. 5 mol/L硝酸铝溶液1 ml,摇匀,放置6 min,加入1. 0 mol/L氢氧化钠溶液10 ml,用蒸馏水定容至25 ml,放置15 min,在波长510 nm处测定吸光度,以浓度C对吸光度A作标准曲线,得回归方程Y=0.373 6X-0.000 8，r=0.999 7，芦丁浓度在（0.005 2～0.031 2）mg/ml范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系。表1 实验因素与水平表2 正交实验结果 2.2.2 样品溶液制备、测定将各提取方法所得样品溶液制成1 g/ml的溶液，按标准曲线测定方法进行测定, 计算 芦丁含量。 2.3 结果分析由表2 表3可知，A，B，D 3个因素对出膏率有显著影响的是A、B和D，影响因素大小的顺序为AD B。最佳组合应为A3D3B2C；而对芦丁有显著影响的是B，C，D因素，影响大小的顺序为D B C。最佳组合应为D3B2C2A。但C因素对出膏率几无影响；A因素对芦丁无显著影响 ，考虑到 工业 大生产的需要，故确定工艺为：A3B2C2 D3，即用12倍量碱性（5%NaOH）稀乙醇(60%) 液提取3次，80 min/次。表3 方差分析 2.4 最佳提取工艺验证在上述最佳条件下进行3次重复实验。结果见表4。 表4 最佳条件验证实验% 实验号芦丁含量15.3125.2435.28 从表4可看出，最佳提取工艺条件具有较好重复性，鱼腥草黄酮得率较高，说明该最佳工艺条件是合理、可靠的。 3 讨论 鱼腥草总黄酮的提取方法很多 文献 都有报道，但文献报道提