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（人教通用）2015届高考生物 考前三个月 知识专题突破练13 生物技术实践 [直击考纲]　1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.利用微生物发酵来生产特定的产物。4.从生物材料中提取某些特定的成分。5.运用发酵加工食品的基本方法。6.植物的组织培养。 考点39　微生物的利用 1．判断下列有关微生物的培养与应用的叙述 (1)常用液体培养基分离获得细菌单菌落(2012·大纲全国，5B)(　×　) (2)用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板(2009·安徽，6A)(　√　) (3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011·新课标全国，39节选)(　√　) (4)测定培养液中微生物数量，可选用显微镜直接计数法计数(2010·山东，34节选)(　√　) (5)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供碳源。发酵过程中检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数(2014·山东，35节选)(　√　) 2．(2013·新课标全国Ⅱ，39)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题： (1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用____________法或____________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。 (2)取该单菌落适当稀释，用__________________法接种于固体培养基表面，在37 ℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。 (3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A__________________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B__________________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________________________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的__________________。 (4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素__________。 答案　(1)划线(平板划线)　稀释涂布(或涂布) (2)涂布　(3)敏感　不敏感　该致病菌对C的敏感性比对A的弱　耐药菌　(4)A 解析　(1)微生物纯化的方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。(2)根据微生物的特点对其进行一系列浓度梯度稀释，然后用涂布法接种于固体培养基表面，再在适宜条件下培养。(3)对某种抗生素越敏感的致病菌，在该抗生素存在的范围内越不易生存，形成的透明圈就越大。故含A的滤纸片周围出现透明圈，说明有抗生素A的地方该致病菌受到抑制；B的周围没有透明圈，说明致病菌对抗生素B不敏感，通过含C的透明圈要比A的透明圈小，说明该致病菌对C的敏感性比A的弱；D出现了透明圈，说明该致病菌对D敏感，但是在透明圈上出现一个菌落，又排除杂菌污染，判断此菌落的微生物对抗生素D产生了耐药性。(4)根据以上分析，为达到抗菌的目的，最好选择抗生素A。 3．(2013·四川，10节选)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。 (1)图甲中，过程①需要的酶有________________________________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是_____________。 (2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是__________________；推测该同学接种时可能的操作失误是__________________________。 (3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________________________。 答案　(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶　淀粉　进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌　(2)稀释涂布平板法　涂布不均匀　(3)工程酵母　工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快 解析　(1)图甲中过程①为构建基因表达载体，需要的酶有限制性核酸内切酶及DNA连接酶；欲筛