分析方法概述1.ppt

分析方法概述（第一部分） 廖林川 四川大学华西基础医学与法医学院 定性分析与定量分析 定性分析 目的 确定检材是不是某种药毒物，或确定检材中是否含有某种或某几种药毒物。 过程 探查方向 初步判断 确证 方法要求 Ø灵敏Ø 具有一定的选择性 定量分析 目的 确定某种药毒物在检材中的含量和浓度，或确定某几种药毒物分别在检材中的含量和浓度。 需定量的情况Ø     医疗中正常用药Ø     饮食或人体中常有的成分Ø     需根据量界定犯罪性质或法律责任的 方法要求 灵敏度不一定很高（能测出即可），但需具有良好的计量关系。R/S=f（x） 定性与定量的关系 定性是定量的基础 界限 有些定性方法在定性的同时就有定量关系。有些定量方法在一定条件下，本身也具有不同程度的定性意义。   随着分析科学和技术的迅速发展，能应用于法医毒物分析并完成毒物的定性鉴别和定量检测任务的分析方法很多，将主要对以下分析方法，尤其是仪器分析方法进行重点介绍。 分析方法类别 方法类别 常用毒物分析方法 形态学方法——外观性状鉴别 通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别 形状：根、茎、叶、花、果实、种子等 大小：大小、长短、粗细等 颜色：表面和内部的色泽 表面特征：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、 毛茸等 质地：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉性等 折断面：平整－粗糙、致密－疏松、断面纹路及颜色。 形态学方法——显微形态鉴别 利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行。 细胞种类: 纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等。 后含物: 如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。 动物试验(animal test) 大多毒性大，且具有较强的生理活性和特殊的中毒症状。 体外检材充裕、新鲜时，可用动物作急性毒性试验或毒效试验，以预试是否有剧毒或有某类毒物存在。 青蛙毒性试验 动物试验(animal test) 免疫分析法 机理：抗原－抗体特异性结合方法 酶免疫法（enzyme immunoassay,EIA) 放射免疫法（radio immunoassay,RIA) 荧光免疫法（luoro immunoassay,FIA) 薄层免疫法（thinlayer immunoassay,TIA) 特点：简便、快速、灵敏，种类有限，试剂较贵。 应用 ：吸毒者和运动员尿液中毒品或兴奋剂的筛查。 尿样滴入S孔内，样品在毛细效应作用下向前迁移。尿样中无吗啡存在或吗啡浓度低于阈值浓度时，因胶体金抗体全部或部分与被固定在板上的吗啡偶联物结合，使测试区（T）内出现一条紫红色的条带。当吗啡高于阈值浓度时，胶体金抗体全部与样品中的吗啡结合，未与吗啡偶联物结合，因此，在测试区不出现紫红色条带。质控区未出现红色线条，说明操作有误或试剂盒失效，结果无效。尿样中吗啡检测阈值浓度为300ng/ml。 测试区（T）吗啡偶联物和被胶体金标记的抗吗啡单克隆抗体 质控区（C） 加样孔（S） 颜色和沉淀反应 机理 大多为生物碱，能与具有氧化性质的酸性试剂反应生成有色物质；或与某些试剂生成沉淀，甚至特殊晶体。 方法 颜色反应: 点滴板 沉淀或结晶反应：载玻片 显微镜 选用原则 选择性和实用性 鸦片生物碱的颜色和结晶反应 吗啡 ＋ 碘－碘化镉钾 马尾松状结晶 用于可疑毒品的预试。 理化方法 常用毒物分析方法 紫外分光光度法 （ultraviolet spectrophotometry） 荧光分光光度法 （fluorescence spectrophotometry） 红外分光光度法 （infrared spectrophotometry） 原子吸收分光光度法 （atomic absorption spectrophotometry） 成分大多结构复杂，一般具有紫外吸收或荧光。 现场收缴纯品药物制剂或较纯的毒品可直接用光谱法检验。 植物、掺假毒品、生物检材，因成分复杂，一般需与色谱联用。 光 谱 法 咖啡因的紫外光谱图 气相色谱法 （gas chromatography GC） 高效液相色谱法 （high performance chromatography HPLC） 薄层色谱法 （thin layer chromatography TLC） 毛细管电泳法 （capillary electrophoresis CE） 色 谱 法 Absorbance Time Diagram of Chromatograph A：全谱扫描方式总离子流图 ；B：毒鼠强的质量碎片图； 根据物质分