抗体酶和其应用前景.pdf

抗体酶及其应用前景 徐应容，党曦俻,石莹，周烨，顾昱晓 摘要：催化抗体也叫抗体酶，是具有催化活性的免疫球蛋白.由于它兼具抗体的 高度选择性和酶的高效催化性，因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适 应各种用途的，特别是自然界不存在的高效催化剂，对生物学、化学和医学等多种学 科有重要的理论意义和实用价值.综述了催化抗体研究的最新进展，讨论了该领域目 前存在的问题，提出了解决这些问题的可能办法。 1．概念介绍： 1.1 关于抗体： 当人体（以及其它高等动物）受到外来抗原的刺激时，其免疫系统会根据抗原的特点（抗 原表面决定簇）产生特定抗体。一般来说，一种抗原可以刺激产生 108种抗体，并且所产生 的抗原均具备极高的特异性，即与抗原强烈结合。 1.2 关于酶： 首先，酶催化具有两个特征，即高催化效率和高选择性。关于酶的催化机制，已有许多 假说，但在众多观点中最有影响的是，鲍林(Pauling) 在 1946 年用过渡态理论阐明了酶催化 的实质，即酶之所以具有催化活力是因为它能特异性结合并稳定化学反应的过渡态(底物激 态) ，从而降低反应能级。他指出，酶通过某种方式与高能、短寿命的过渡态结合而起催化 作用。这个过渡态构型中某些键在形成，另一些键在断裂，存在时间极短，半衰期约为 10 ~10 s，实际中极难捕获。 1.3 二者对比： 抗体和酶的根本不同在于前者是结合一个基态分子，并且抗原与抗体结合后会发生沉 淀，一般条件下不会自动分离，而抗体选择性的结合一个化学反应的过渡态，帮助反应顺利 进行，在完成反应后的瞬间与生成物迅速分离 2.背景知识： 1946 年，Pauling 用过渡态理论阐明了酶催化的实质，后经过 Jencks 等人的探索，他们 发现，过渡态分子难以捕获，而过渡态类似物是能够模拟一个酶催化反应过渡态的结构的稳 定物质，于是设想，只要寻找到与反应中决定性步骤的相应酶紧密结合的酶竞争性抑制剂， 就等于发现了过渡态类似物；还有一种思路，就是这种类似物也能根据化学反应机制推测设 计出来。然后，以过渡态类似物为半抗原，利用哺乳动物的免疫系统，诱导与其互补构象的 抗体产生，这种抗体即具有催化活性；接着，Kohler 和 Milstein 于 1975 年发明了具有历史 意义的单克隆技术，使抗体酶的生产成为可能。 1984 年 Lerner 进一步推测：以过渡态类似物作为半抗原，则其诱发出的抗体即与该类 似物有着互补的构象，这种抗体与底物结合后，即可诱导底物进入过渡态构象，从而引起催 化作用。根据这个猜想 Lerner 和 P ．C ．Schultz 分别领导各自的研究小组独立地证明了：针 对羧酸酯水解的过渡态类似物产生的抗体，能催化相应的羧酸酯和碳酸酯的水解反应。1986 年美国《Science》杂志同时发表了他们的发现，并将这类具有催化能力的免疫球蛋白称为 抗体酶（abzyme ）或催化抗体（catalyticantibody ）。 3.抗体酶的制备 3.1 抗体酶的制备原则 实现抗体向酶转变的关键是抗原能诱导已具有酶活性的抗体。要使抗体具备催化活性即 要使其具备酶的特征，为使抗体具有酶的结构，就必须在抗原的结构上进行改造。而抗体设 计的原则就是酶的催化机制，故免疫学原理以及过渡态理论是抗体酶设计的主要依据。 酶－底物、抗体－抗原的结合模式是相近的，即均具有高亲和力和空间结构及电荷分布 上的互补特性。但上述两种结合对象不同，由于抗体仅仅与低能结构结合，所以通常情况下 抗体不具备催化活性。 那么，若利用某一反应过渡态的模拟物作为抗原，则可得到催化该反应的抗体。且这一 过渡态类似物具有稳定结构，这样就可以用化学手段加以合成。 制备抗体酶的关键在于设计半抗原，只有这种特定的抗原才能诱导具有酶样结构与功能 的抗体。 3.2 制备抗体酶的主要策略 3.2.1 利用抗体稳定带电过渡态 到目前为止，大多数抗体酶是通过理论设计合理的、与反应过渡态类似的小分子作为半 抗原，继而让动物免疫系统产生针对半抗原的抗体来获得。由于针对半抗原的抗体在几何形 状和电学性质上与反应过渡态互补，故可以稳定过渡态，加速反应。 在这方面最早设计出的催化抗体是像酯水解反应一样具有较低活化能的酰基转移反应。 根据金属肽酶的研究成果并以磷酸酯作为碳酸酯的过渡态类似物，Lerner 小