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第三章人工授精技术精要
(三)自动工厂化细管冷冻精液生产工艺的应用。 标准化的生产,提高了冻精的产量、质量(菌落数量减少),增加经济效益。 (四)种公牛科学饲养管理 全价日粮、合理的饲养方式、适宜的环境、日常保健、合理调教等措施的采用,延长利用时限(北京种公牛站由63月龄→98月龄)。 奶牛育种过程中,对产奶量高强度选择使高产奶牛繁殖力下降,特别表现在产后发情延迟、早期胚胎死亡、流产及子宫疾患。 (一)定时发情和输精 针对产后发情表现不明显、安静发情,卵巢活性差的母牛。 LRH-A3 20μg诱导卵泡液中的卵泡排卵形成黄体,7d后注射PGF2α 3mg溶黄体,诱导发情,2d后注射LRH-A3 20μg,16~20h后输精。受胎率与对照组差异显著。 (二)促进黄体功能 hCG的应用:周期5d或14~16d注射hCG 1000~1500 IU,诱发副黄体,辅助妊娠 干扰素τ的抗溶黄体作用(妊娠信号)。 促生长因子、生长素(GH)、胰岛素和类胰岛素生长因子(IGF-1)等的促早期胚胎发育防退化作用。 (一)X、Y精子的分离 1.仪器的改进和效率的提高 流动细胞分类检索仪经改进,目前效率达到每小时分离X、Y精子各1000万(一个输精剂量)。实用标准为100个剂量/h。 用无毒的荧光染料与精子DNA结合。由于X-精子和Y-精子的DNA含量不同(X精子DNA含量比Y精子高3.8%),所发出的荧光量也不同。这样,通过计算机控制,使发荧光量不同的精子带上不同的电荷(X-精子带正电荷,Y-精子带负电荷)。 最后,在精子通过高压电场时,带不同电荷的精子发生偏斜而进入不同的收集管内。 2.提高分离精子利用效率的途径 低精液量输精:500万~200万有效精子。 分离鲜精输精。 小剂量200万/支,用于体外单一性别胚胎的生产。 单精注射(ICSI)。 (二)胚胎性别鉴定:PCR检测法 是目前唯一的、常规的、最具有商业应用价值的鉴定胚胎性别的方法。 1.减少取样对胚胎的损伤 2.缩短检测时间 3.防止假阳性 (一)工艺进一步成熟:移植前对胚胎质量的检查和筛选、受体选择、饲养管理和同期化程度,部分生产应用达到30%以上的受胎率。 (二)分离精子体外雌性胚胎的生产 (三)活体采卵效率的研究 B超活采仪 活体采集的牛卵母细胞 卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱 卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱 韩雪蕾 一、人工授精技术的定义 二、人工授精技术的优越性 三、人工授精技术的技术程序 四、精液的保存技术 五、人工授精技术与胚胎移植技术的关系 六、牛繁殖技术进展 人工授精技术是利用器械采集雄性动物的精液,经检查和处理后,再用器械将精液输入到发情雌性动物的生殖道内,以代替自然交配而繁殖后代的一种技术。 人工授精技术经历了三个发展阶段: 试验阶段 生产性实用阶段 冷冻精液阶段 二、人工授精技术的优越性: 提高优良种公畜的配种效能和种用价值,扩大配种头数 牛:自然交配——1:40~1:100头/年, AI——1:6000~1:12000头/年。 大幅度减少种公畜的头数,降低饲养成本 加速家畜品种改良,促进育种工作进程 防治各种疾病,特别是生殖道传染病的传播(布氏杆菌病,衣原体感染,沙门氏菌病,病毒性腹泻) 有利于提高母畜的受胎率 克服公母畜体形悬殊而出现的交配困难,克服“无障碍配种” 有利于种质交流和扩大配种地域 年份 方法 年均产奶量 1946 本交 1900kg/头 1966 人工授精技术 3826kg/头 1986 人工授精技术+ 冷冻精液 5846kg/头 三、人工授精技术的技术程序 人工授精技术的技术程序: 采精 精液品质检查 精液稀释 精液的分装 精液的保存(液态保存、冷冻保存) 精液的运输 精液的解冻与检查 输精 概括来说,动物人工授精技术由采精技术、 精液处理技术和输精技术三大部分组成。 1.采精 家畜的采精方法 : 假阴道法 适用于各种家畜(犬除外)。 手握法 适用于猪。 按摩法 适用于禽类、犬科动物(对不能站立的牛也可用) 电刺激采精法 适用于野生兽类的采精方法,(常需用氯胺酮等镇静剂保定,但采出的精液往往射精量大而精子密度很低;对某些动物如家兔只能引起阴茎强直性勃起而不射精)。 2.精液品质检查: (1)常规检查:射精量,色泽 ,气味,云 雾状,pH值 (2)精子活率 (3)精子密度 (4)死活精子百分率 ⒉定期检查 ⑴精子计数(亿/毫升) ⑵死、活精子百分率测定 ⑶精子畸形率测定 ⑷精子顶体完整率的测定 3.精液稀释 ⒈营养剂:功能作用。主要是糖类(果糖、葡
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