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分子生物技术(改)
分子生物学:分子生物学包括对蛋白质和核酸等大分子结构和功能的研究,以及从分子水平上阐述生命的现象和生物学规律(广义)。分子生物学是研究生物体主要遗传物质——基因或DNA的结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程的科学(狭义)染色质:细胞核内可以被碱性燃料着色的一类非定形物质.核酸:一切生物的遗传物质,核糖核酸和脱氧核糖核酸.核酸分为两类,核糖核酸(RNA)脱氧核糖核酸(DNA)DNA的一级结构:DNA数量庞大的4种脱氧核苷酸通过3’,5’-磷酸二脂键连接而成,也就是DNA分子内碱基的排列顺序.DNA的二级结构:两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构.复制叉:DNA复制时,在一定位置解开双链,这个复制起点呈现叉子的形式.复制子:生物体能独立进行复制的单位.DNA解链酶或解螺旋酶:使复制叉前方的DNA双链解开一段的酶单链结合蛋白:与每一条分开的DNA链紧密结合以防止它们在接触重新结成新的碱基对DNA旋转酶或拓扑异构酶II:它兼有内切酶的活力和连接酶的活力能迅速使DNA链断开并又连上半不连续复制过程:新DNA的一条链按5→3方向,连续合成的(前导链),另一条链的合成则是不连续的,按3→5方向合成若干短片段(冈崎片段),在通过酶的作用将这些短片段连在一起构成第二条子链(后随链).DNA聚合酶I:5→3有核酸外切酶的活性,保证了DNA复制的准确性,也可用以除去冈崎片段5’端RNA引物,使冈崎片段间缺口消失,?保证连接酶将片段连接起来.DNA聚合酶II:起修复DNA作用.DNA聚合酶III:是大肠杆菌DNA复制中链延长反应的主导聚合酶DNA的损伤:生物体生命过程中DNA双螺旋结构发生的任何改变.(自发性损伤,物理损伤,化学损伤)基因:生物的DNA或RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位.外显子:基因中对应于信使RNA编码序列的区域.内含子:不编码的间隔序列,是在信使RNA被转录后的剪接加工中被去除的区域.基因组:细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和;或指原核生物染色体,质粒,真核生物的单倍体染色体组,细胞器或病毒中,所含有的一整套基因.(原核生物的真核生物基因组包括染色体基因组和染色体外的质粒基因组等).真核生物的基因组:真核生物的基因组包括染色体基因组和核内的染色体外基因,以及细胞质的线粒体,叶绿体基因组等.原核生物的基因组:原核生物基因组包括染色体基因组和染色体外的质粒基因组。反义链(负链、模板链):用于转录的链义链(正链、编码链):用于转录所对应的链大肠杆菌RNA聚合酶:由2个α亚基,一个β亚基,一个β’亚基和一个w亚基组成,称为核心酶,加上一个σ?亚基后则成为聚合全酶.启动子:是一段位于基因5端上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确结合并具有转录起始的特异性。5’ 端帽结构:目前所知5’端帽结构是在核内完成的,且先于对mRNA中段序列的剪切过程,加帽的作用部位在转录后的mRNA5’端的第一个核苷酸上。由前面内容可知,RNA5’端的第一个核苷酸以嘌呤类多见,尤以pppG为主3’端加尾:真核生物成熟的mrna3’端通常都在100~200个腺苷酸残基,构成多聚腺苷酸尾。起始密码子:AUG为甲硫氨酸兼起始密码子终止密码子:UAA、UAG、UGA为终止密码子SD序列:细菌的mRNA通常含有一段富有嘌呤碱基的序列,SD序列位于其实AUG上游10个碱基左右的区域简答题:原核生物DNA基因组的特点:①结构简练.大部分用来编码蛋白质只有非常少的一部分不转录②基因种类和数量较少.③以操纵子为转录单元.真核生物染色体组成:DNA.蛋白质.少量RNA真核生物基因组与原核基因组的区别:①真核生物基因组远远大于原核生物基因组,且具有相当的复杂度;②细胞核中的DNA与蛋白质结合,形成的染色体存在于核内;③基因组中不编码区域远远多于编码区域;大部分基因有内含子,因此基因的编码区域不连续;存在着重复序列,重复次数从几次到几百万次不等;④基因组中以多复制起点的形式复制;DNA双螺旋的解旋(三种酶):DNA解链酶或解螺旋酶,单链结合蛋白,DNA旋转酶或拓扑异构酶IIRNA聚合酶的功能:2个α亚基,核心酶组装,启动子识别。一个β亚基,β和β’共同形成RNA合成的活性中心一个β’亚基,与模板DNA、新生RNA链及酶相结合,一个w亚基,称为核心酶,加上一个σ?亚基,引导全酶识别并结合于启动子。原核生物的启动子结构:起始部位(指DNA分子上开始转录的作用位点),结合部位(是DNA分子上与RNA聚合酶的核心酶结合的部位,富含TATAAT序列,故称之为TATA盒)识别部位真核细胞mRNA加工过程:①5’加帽,②3’加尾,③mRNA中段序列的剪接原核生物tRNA的加工:①由核酸内切酶切断tRNA两端;②核酸外切酶从3’端逐个
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