高效液相色谱法的分类及原理.docVIP

高效液相色谱法的分类及其分离原理高效液相色谱法分为：液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。1.液-固色谱法（液-固吸附色谱法） 固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。 液-固色谱法的作用机制 吸附剂：一些多孔的固体颗粒物质，其表面常存在分散的吸附中心点。　　流动相中的溶质分子X（液相）被流动相S带入色谱柱后，在随载液流动的过程中，发生如下交换反应：　　X（液相）+nS（吸附）==X（吸附）+nS（液相）　　其作用机制是溶质分子X（液相）和溶剂分子S（液相）对吸附剂活性表面的竞争吸附。　　吸附反应的平衡常数K为：　　K值较小：溶剂分子吸附力很强，被吸附的溶质分子很少，先流出色谱柱。　　K值较大：表示该组分分子的吸附能力较强，后流出色谱柱。　　发生在吸附剂表面上的吸附-解吸平衡，就是液-固色谱分离的基础。 液-固色谱法的吸附剂和流动相 常用的液-固色谱吸附剂：薄膜型硅胶、全多孔型硅胶、薄膜型氧化铝、全多孔型氧化铝、分子筛、聚酰胺等。 一般规律：对于固定相而言，非极性分子与极性吸附剂（如硅胶、氧化铜）之间的作用力很弱，分配比k较小，保留时间较短；但极性分子与极性吸附剂之间的作用力很强，分配比k大，保留时间长。 对流动相的基本要求：　　试样要能够溶于流动相中　　流动相粘度较小　　流动相不能影响试样的检测 常用的流动相：甲