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高效液相色谱知识分享? 总述：根据样品在流动相和固定相中的分配系数的不同将组分分离开来，依次通过紫外检测器检测，再通过色谱工作站输出色谱流出曲线，依据色谱流出曲线我们可以得到：“色谱峰个数——组分最少个数；保留值——定性分析；面积、峰高——定量分析；保留值、区域宽度——判断色谱柱的分离效能；两峰间的距离——评价固定相、流动相的选择及配比是否合适”等信息。 下面从以下几方面进行阐述（原理、设备、注意事项）： I．概论 一、液相色谱理论发展简况 1、色谱法的诞生 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。 2、HPLC的特点和优点 2.1 HPLC有以下特点： 高压-压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。 高速-流速为0.1~10.0 ml/min。 高效-可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度-紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点： 速度快-通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。 分辨率高-可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。 灵敏度高-紫外检测器可达0.01n