关于面粉中NaFeEDTAHPLC检测方法探讨.docVIP

关于面粉中NaFeEDTA的HPLC检测方法研究 　　[摘 要]在1999年，卫生部门正式批准将NaFeEDTA作为铁营养强化剂在各种食品中开始使用，这能够有效的增加食物的口感，并改善人们出现的缺铁性贫血的现状。但是采用传统的检测方法，难以有效的检测出面粉中NaFeEDTA成分的含量。本文主要是研究HPLC检测方法来检测面粉中的NaFeEDTA成分，检测过程较为快速、简单，并具有重现性好的特征，该方法具有一定的可行性，值得推广 [关键词]面粉；NaFeEDTA；HPLC检测方法 中图分类号：TS211.7 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）16-0013-01 引言：随着社会经济的进步，人们是对其生活水平和质量的要求不断提高，再加上近几年来频频发生的食品安全事故，人们开始更加的重视食品安全问题。面粉是人们在日常生活中不可缺少的粮食之一，特别是在我国北方的饮食中占据着重要的地位，为了提高其口感，生产厂家开始在面粉中添加NaFeEDTA，但是传统的检测方法难以区分出NaFeEDTA与其他铁盐，因此采用HPLC检测方法来检测面粉中的NaFeEDTA具有重要的意义 一、实验材料 （一）试剂与原料 从当地购买面粉，并从相关公司购买回40%的TBAOH（四丁基氢氧化铵）水溶液和NaFeEDTA 标准物。其中甲醇的性质为色谱纯；NaOH、盐酸 等试剂的性质为优级纯；甲酸与其他试剂的性质为分析纯，在实验的过程中所用的水都是超纯水，即18.2MΩ.cm （二）仪器 Waters600型高效液相色谱分析仪、Waters2487型紫外检测器及Empower 色谱工作站、Millipore公司超纯水仪、北京瑞利公司WFX-210型原子吸收光谱仪、酸度计、离心机、漩涡离合器以及其他常用实验室仪器。本次试验需要在避光的条件下进行操作[1] 二、实验方法 （一）制备标准溶液 选取200.0mg的NaFeEDTA 标准物，用水完全溶解之后再放入到100mL的容量瓶中进行定容，NaFeEDTA标准储备液的浓度为每毫升2000μg。在50ml的容量瓶中放入2.50ml的NaFeEDTA标准储备液，再加入75%（V/V）的甲醇溶液，充分摇匀之后进行定容；再在6个50ml的容量瓶中分别放入0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mL，分别用水进行定容，这样就可以得到浓度在0.2～20.0μg/mlNaFeEDTA标准使用液 （二）制备和处理强化面粉样品 在国际GB14880规定中指出，每千克谷物以及面粉中添加NaFeEDTA的含量在180～360mg之间[2]。在本次试验中使用的铁强化面粉样品中的NaFeEDTA的含量是每千克300mg。采用原子吸收试验测制备的铁强化面粉样品中的总铁，其混合均匀度的变异系数显示为小于2.0%（n=6） 在50ml的比色管中放入2.50g的上述样品，再加入30ml的水，用漩涡混合器振动和摇晃混合物，在4min之后放入50ml的容量瓶中，在阴暗处定容， 30min后取出混合溶液的上清液，用离心机以3000r/min的速度离心15min，再次取出上清液，最后进行过滤，滤膜使用的是0.2μm 微孔滤膜 （三）色谱条件 色谱柱：ZorbaxC8（4.6×150mm，5μm） 配置流动相：在88%的甲酸溶液加水，将其稀释成10倍的甲酸实验溶液；在烧杯中放入3.25ml的浓度为40%的四丁基氢氧化铵水溶液，再加入130ml的水；向烧杯中滴入甲酸实验溶液，将烧杯溶液的pH值调整为3.30，然后将所有的溶液倒入1000ml的容量瓶中，再加入125ml的甲醇，并让容量瓶中加水，稀释至刻度，并充分的摇匀，这时溶液的pH值为3.50 （四）样品测定和含量计算 采用相同的实验方式，对每种样品都进行重复测定，一般不少于三次，并用标准曲线来进行定量，一般标准曲线的横坐标表示浓度，纵坐标表示峰面积。本次试验可以得出下图所示的标准曲线，根据标准曲线，就可以得出NaFeEDTA在铁强化面粉样品中的含量 三、结果和讨论 （一）提取剂的选择 在本次试验中选择的提取剂是水，这主要是由于NaFeEDTA在水当中具有极强的溶解能力[3]。一般是室温的条件下，溶解度为每100g的水可以溶解10g的NaFeEDTA[4]。HPLC检测方法对提取液的浓度具有一定的要求，一般条件下浓度在10μg/ml 左右，这样可以简化试验步骤[5]。在本次试验中使用的是50ml左右的水，用来提取2.5g的面粉 在实验的过程中，需要充分的混合面粉和水，这能够使两者之间充分的接触。经过试验比较现实，漩涡混合器的混合效果更好，具有极高的提取效率，所以在实验的过程