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CYP2C19基因多态性检测方法的建立_黄杰
—1562 — 药物分析杂志Chin J Pharm Anal 2015 ,35 (9)
CYP2C19 基因多态性检测方法的建立
1 1 2 2 1 1*
, , , , ,
黄 于 张 蔡 高 曲
杰 婷 喆 从利 尚先 守方
(1. , 100050 ;2. , 430075)
中国食品药品检定研究院 北京 武汉友芝友医疗科技有限公司 武汉
: CYP2C19 PCR- , CYP2C19 。
摘要 目的 建立检测 基因多态性的 荧光探针法 为预测 代谢药物的疗效提供新的检测试剂盒 方
: Primer Express 3. 0 CYP2C19 CYP2C19* 2 、CYP2C19* 3 CYP2C19* 17
法 应用 软件针对人类 基因 和 多态性位点设计引物和
。 、 DNA (genomic DNA ,gDNA) ,
探针 以经测序确认为杂合突变型 纯合突变型或野生型的人类全血基因组 样本为模板 应用荧
PCR , CYP2C19 PCR 。
光 法筛选合适的引物和探针 建立和优化 基因多态性检测荧光 法 然后用特定浓度且基因型已知的人类
gDNA 、 。 100 ,
全血 样本作为质控品评价该方法的准确性 灵敏度和特异性 最后用 例临床样本验证该方法的临床适用性 并与
, Kappa 。 : CYP2C19 PCR- , CYP2C19
直接测序结果进行比较 计算 值 结果 建立的 基因多态性检测 荧光探针法 能准确地检测出
* 2 、* 3 * 17 ; 1 ng ; gDNA
和 多态性位点杂合突变型和纯合突变型 灵敏度为每个反应体系约 以基因型已知为野生型的全血
。
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