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头孢替安酯片 含量分析方法验证方案 方案编号： PROTOCOL NO. V-154 生效日期： Eff. DATE 替代： SUPERSEDES 总页数： PROTOCOL CONTAINS PAGES 6 pages 方案审批 PROTOCOL APPROVAL 准备人 Prepared by 姓名 Name 签名Signature 日期 Date 质量控制部 Quality Control 审批人 Reviewed By 姓名 Name 签名Signature 日期 Date 质量控制部 Quality Control 质量保证部 Quality Assurance 批准人 Approved By 姓名 Name 签名Signature 日期 Date 质量保证部 Quality Assurance 2.0概述 2.1目的 证明头孢替胺酯片含量测定的分析方法Sr. 实验设备及试剂 1 高效液相色谱仪（Waters 2487）Aglient1200 2 玻璃容器 3 头孢替胺酯工作对照品 4 纯化水 磷酸 磷酸二氢钾 乙腈（色谱纯） 5 头孢替胺酯片样品 3.0 实验室操作程序 3.0.1 方法摘要 头孢替胺酯片含量测定依照日本药典采用高效液相色谱内标法进行计算。规定限度为标示量的90.0％－110.0％。 3.0.2 液相色谱条件 色谱柱：C18硅烷键合硅胶柱 流动相：0.2M磷酸氢二钾(1→2)：乙腈：冰醋酸（72:28:1） 稀释液：1%磷酸：乙腈=4:1 检测波长：254nm 进样量：20ul 3.0.3操作步骤（方法学） 3.0.3.1内标物溶液的配制 3.0.3.2 系统适用性溶液的制备： 精密称取头孢替胺酯对照品约18mg置20ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取续滤液5ml和5ml内标液置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀即可。头孢替胺酯反式异构体两个峰之间的分离度。 验证参数 4.0.1专属性： 专属性是指在其他成分如辅料可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。 a. 系统精密度 b. 方法精密度 c. 中间精密度 系统精密度： 此项是确认同一分析员用同一试剂和设备所测结果的重复性。以此来评估设备和试剂的可靠性。 程序： 按方法学项下方法准备对照品溶液，重复进样6次，计算相对标准偏差。 可接受标准： 相对标准偏差应不大于1％ b.方法精密度 此项是确认同一分析员配制6个溶液的重复性。 程序： 按方法学用同一批样品进行含量的测定。 可接受标准 相对标准偏差应不大于2％。 C.中间精密度 中间精密度是用同一批号的样品由两个分析员用不同的设备在不同的日期检测含量重复性。 程序： 按方法学的方法用同一批样品进行含量的测定，计算方法精密度和中间精密度之间的相对标准偏差。 可接受标准 总的相对标准偏差不大于2％。 4.0.3线性和范围 分析方法的线性是指在设定的范围内测试结果与试样中被测物浓度直接称呈正比关系的程度。 分析方法的线性是通过预先配制一定浓度范围的标准溶液测定其响应值。线性曲线是由溶液的浓度和峰面积描绘出来的，相关系数则利用上述曲线计算。 程序： 按方法学用头孢替安酯对照品配制浓度为0.035mg/ml、0.045mg/ml、0.06mg/ml、0.072mg/ml、0.085mg/ml的标准溶液。以各标准溶液的浓度和对应峰面积绘制线性图并求出回归方程，计算相关系数。 可接受标准 相关系数不低于0.999 4.0.4准确度 准确度是指用该方法测定的结果与真实值接近的程度。通常用回收率（％）表示。 称取对照品及辅料适量配置成相当于对照品浓度的80％（0.048mg/ml）、100％（0.06mg/ml）、120％（0.072mg/ml）的溶液各三份，在规定的色谱条件下测定。 程序： 按方法学项下方法配制80%、100%、120%的溶液 样品溶液的配制 0.048mg/ml（80％）溶液的制备 称取头孢替安酯对照品约14mg及相应的辅料20ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取续滤液5ml和5ml内标液置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀即可。制成约0.048mg/ml的溶液。 0.060mg/ml（100％）溶液的制备 称取头孢替