化学发光免疫解析.pptVIP

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化学发光免疫分析技术 与临床应用 化学发光免疫检测技术起源 Halman在1977年基于放射免疫分析的基本原理,将酶的化学发光与免疫反应结合起来,建立了化学发光免疫分析方法。(Chemiluminescenceimmunoas) 什么是化学发光? 人体内的某些化合物分子被氧化后,可以形成激发态并返回基态同时发射光子,这就是化学发光。 化学发光免疫检测技术是利用发光信号测量仪器测量光量子的产额。该技术可以有效的消除样本的本底干扰,消除样本对光信号的散射,从而获得更高的检测灵敏度。 化学发光免疫分析原理: 免疫反应系统: 将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或标记抗体(免疫化学发光分析)上,或用酶作用于发光底物。 化学发光分析系统: 利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时发射出光子(hv),利用发光信号测量仪测量光量子的产额,就可测知体内某些微量生物活性物质的含量。 化学发光免疫分析类型: 根据标记物的不同分为三大类: 1、化学发光免疫分析 2、化学发光酶免疫分析 3、电化学发光免疫分析 甲状腺激素不敏感综合症: 一、全身型:1、甲减型 T3、T4、TSH 2、代偿型 T3、T4、TSH 二、垂体型:甲亢症状明显:T3、T4、TSH 三、外周选择型: T3、T4、TSH (正常) 临床甲减症状 甲状腺炎扫描图 正常甲状腺扫描图 治疗1个半月后 治疗后检测结果显示各项指标正常 治疗后恢复正常 临床常见的甲状腺疾病种类: 1、甲亢:大概分为13种,三大类。 2、甲减:分为原发性、继发性。 3、甲状腺炎:分5种。 4、甲状腺肿瘤:良性、恶性。 5、甲状腺肿:青春期、结节性甲肿。 6、TH 不敏感综合征:三大类。 * 临床核医学 诊断核医学 (影像诊断) 治疗核医学 体外分析技术 (放射免疫分析) (化学发光免疫分析) 化学发光免疫分析 化学发光分析系统 免疫反应系统 化学发光免疫检测技术: 优点:安全,灵敏度高(10-15g/ml),稳定性好,重复性较佳,结果漂移小,线性较好,准确度高,操作方便,试剂货架期长(半年~1年),浪费少,出结果快速。 缺点:仪器价格昂贵,试剂成本较高,目前有些检测项目不能用化学发光检测,待开发。 化学发光技术与其他免疫分析技术比较: ? 免疫诊断技术在经历了放射免疫法、酶标免疫法、免疫荧光法等方法后,发展到今天,化学发光技术的出现并临床应用,为现代医学免疫诊断技术的发展奠定了一个划时代的里程碑。 . 1、 放射免疫法: 1、 放射免疫法缺陷: 同位素半衰期短(125I半衰期60天)及需要特殊水源处理装置,污染问题、试剂有效期短、出报告时间长(一般要2天)、标准曲线稳定性差,但在有些发达国家仍在使用,完全能满足临床需要。 2、 酶标记免疫分析缺陷: 由来已久,但是始终没有能够替代放射免疫。这种依靠比色法或偏振光法的检测技术所受的干扰因素太多,甚至试管的形状的变化都会影响实验结果,灵敏性、稳定性、重复性均较差(可测灵敏度为10-8g/ml)。 3、 荧光免疫分析技术缺陷: 利用特定波长的入射光将分子转换到激发态,然后分子回到基态并发射光子。但有以下干扰因素: 1) 血清样本中存在内源性荧光带,会增强非特异性本底荧光; 2) 样本对荧光光信号的散射也干扰实验结果。 化学发光免疫检测技术临床应用: 1、甲状腺功能类: T3 、T4、THS、FT3、 FT4、rT3、TG、T-PO 新生儿筛查:T4 sTSH 2、性腺激素类: HCG、?-HCG、FSH、 LH、E2、E3、PRL、P、 T、GH等 3、肿瘤检

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