番木瓜果皮和种子总RNA提取方法的研究.pdf

2006 12 26 6 年 月 热 带 农 业 科 学 第 卷第 期 Dec.2006 CHINESEJOURNALOFTROPICALAGRICULTURE Vol.26,No.6 番木瓜果皮和种子总RNA提取方法的研究① 王静毅 郑丽珊 冀小蕊 邓柳红 武耀廷② 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 ( 海口市 571101) 热带作物生物技术 国家重点实验室 CTAB SDS RNA 107.8 90.4 70.4 g/g 摘 要 法、 法和改良的热硼酸法所提取的番木瓜果皮总 产量分别是 、 和 μ ; RNA 164.0 204.8 111.2 g/g TSSE TE CTAB LiCl 种子总 产量分别是 、 和 μ 。用 或 溶液溶解 法中的 过夜沉淀,得到 的总RNA完整性好、纯度高,种子总RNA的产量明显提高,达到 300 g/g以上。用CTAB法提取的果皮和种子 μ 总RNA cDNA (SSH) 已成功用于 合成、文库构建和抑制消减杂交 等后续分子生物学试验。 关键词 番木瓜 RNA SSH ;果皮 ;种子 ;总 ; 分类号 Q522 TotalRNAIsolatedfrom PericarpandSeedsofCaricapapayaLinn. WANGJingyiZHENGLishan JIXiaoruiDENGLiuhong WUYaoting (InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology/StateKeyBiotechnologyLaboratory forTropicalCrops,CATAS,Haikou571101) Abstract CTAB,SDSandmodifiedhotboratemethodswereappliedtoextracthighqualityRNAfrom thepericarpandseedsofCaricapapayaLinnaeuswhichcontainsabundantpolyphenols,polysaccharides, proteins,pectinsandsecondarymetabolites.ThesethreemethodsproducedrespectivetotalRNAyieldsof 107.8 g/g,90.4 g/gand70.4 g/gfromthepericarp,and164.0 g/g,204.8 g/gand111.2 g/gfrom μ μ μ μ μ μ theseeds.TheimprovedCTABmethodsignificantlyenhancedtheyieldofhigh-qualityRNAofseeds (morethan300 g/g).TheextractedRNAfromthepericarpandseedswassuccessfullyappliedforcDNA