香烟提取物对人支气管平滑肌细胞DNA的损伤作用及细胞应激的影响.pdf

·2028 · 中国病理生理杂志 　Chinese Journal of Pathophysiology 　2004 ,20 ( 11) :2028 - 2032 ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2004 11 - 2028 - 05 香烟提取物对人支气管平滑肌细胞 D NA 的损伤 作用及细胞应激的影响 谢俊刚 , 　徐永健 , 　张珍祥 , 　倪 　望 , 　陈仕新 (华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科 , 湖北 武汉 430064) ( ) ( ) 　　[摘 　要] 　 目的:探讨香烟提取物 CSE 对人支气管平滑肌细胞 DNA 损伤和细胞应激 热休克蛋白70 表达 的 影响 。方法 : 以 1 mL 培养液中含 30 mL 烟雾作为原液 ,分别以 1/ 16 、1/ 10 、1/ 8 、1/ 6 和 1/ 4 浓度与正常人支气管平滑 ( ) 肌细胞培养 3 h ,采用单细胞琼脂糖凝胶电泳 即彗星实验 和 Western 印迹技术检测细胞 DNA 损伤和热休克蛋白70 ( ) ( ) ( ) HSP70 的表达 。结果 : 随着培养液中 CSE 浓度的增加 ,细胞受损的百分率 拖尾细胞百分率 及受损的程度 尾长 ( ) 。随着培养液中CSE 浓度的改变 ,结果发现 逐渐增加 ,除 1/ 16 原液外 ,其它与阴性对照之间均有显著差异 P 005 含 1/ 16 和 1/ 10 原液的 CSE 刺激后 HSP70 的表达有轻度增高的趋势 ,而含 1/ 8 原液 - 1/ 4 原液的 CSE 刺激后 ,HSP70 ( ) 的表达逐渐降低 。其中含 1/ 6 原液组和含 1/ 4 原液组与阴性对照组之间 HSP70 的表达有显著差异 P 005 。结 ( ) 论 : CSE 可导致支气管平滑肌细胞 DNA 的损伤并伴有细胞保护蛋白 HSP70 合成的减少 ,可能与慢性阻塞性肺疾病 (COPD) 的发病有关 。 [ 关键词] 　烟雾吸入损伤 ; DNA 损伤 ; 热休克蛋白质 70 ; 支气管 　　[ 中图分类号] 　R363 　　　　　[文献标识码] 　A ( ) [4 ] 　　慢性阻塞性肺疾病 chronic obstructive pulmonary 化损伤 的伤害 。为探讨香烟烟雾对气道细胞 diseases , COPD) 是严重的呼吸系统疾病 ,近年来其患 DNA 损伤和细胞应激的影响 ,本实验以人支气管平 病率逐渐增加 , 是当前世界上死亡原因的第 四位 。 滑肌细胞为靶细胞 ,研究烟雾对气道细胞的DNA 损 引起 COPD 的危险因素包括个体易感因素以及环境