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掺锶聚磷酸钙共培养成骨细胞与内皮细胞:行为和功能蛋白的变化
彭 红,顾志鹏,黄程程,徐源廷,余喜讯(四川大学高分子科学与工程学院,四川省成都市 610065)
文章亮点:
1 前期实验发现掺锶聚磷酸钙材料对于单独培养的内皮细胞和成骨细胞的行为有显著促进作用。文章的创新在于首次从分子水平探讨掺锶聚磷酸钙对共培养下成骨细胞与脐静脉内皮细胞行为和功能蛋白表达的影响。
2 文章的特点在于首次发现成骨肉瘤细胞与内皮细胞共培养于掺锶聚磷酸钙后,掺锶聚磷酸钙上调了细胞血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白水平的表达。今后将对血管初期成型方面进行进一步研究,使体系更完善。
关键词:
生物材料;骨生物材料;掺锶聚磷酸钙;内皮细胞与成骨细胞共培养体系;血管内皮生长因子;碱性成纤维细胞生长因子
主题词:
生物相容性材料;磷酸钙类;锶;内皮细胞;成骨细胞
摘要
背景:前期实验发现掺锶的聚磷酸钙材料对单独培养内皮细胞或成骨细胞的行为有显著促进作用。
目的:观察掺锶聚磷酸钙对共培养下成骨细胞与脐静脉内皮细胞行为和功能蛋白表达的影响。
方法:取第3代人脐静脉内皮细胞与人成骨肉瘤细胞MG63以2∶1的浓度比接种于24孔板中,然后再分别加入掺锶聚磷酸钙、聚磷酸钙与羟基磷灰石,共培养7 d后。采用ELISA法检测细胞血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达,采用MTT法检测细胞活性。
结果与结论:与聚磷酸钙与羟基磷灰石相比,在掺锶聚磷酸钙表面生长的细胞呈现更加良好的形态,细胞融合生长形成单层覆盖在材料表面,并且在材料表面有一定的跨度生长,说明掺锶聚磷酸钙材料能促进内皮细胞在其上黏附、伸展,有利于细胞的生长和增殖。掺锶聚磷酸钙组细胞分泌的血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子明显高于聚磷酸钙组和羟基磷灰石组(P 0.05),说明掺锶聚磷酸钙可上调血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达。
彭红,顾志鹏,黄程程,徐源廷,余喜讯. 掺锶聚磷酸钙共培养成骨细胞与内皮细胞:行为和功能蛋白的变化[J].中国组织工程研究,2014,18(3):365-370.
Effects of strontium-doped calcium polyphosphate on behavior and angiogenic growth factors expression of co-cultured osteoblasts and endothelial cells
Peng Hong, Gu Zhi-peng, Huang Cheng-cheng, Xu Yuan-ting, Yu Xi-xun (School of Polymer Science and Engineering, Sichuan University, Chengdu 610065, Sichuan Province, China)
Abstract
BACKGROUND: Our previous studies have shown that strontium-doped calcium polyphosphate containing low-dose strontium appears to have a significant effect on angiogenesis-related behaviors of monocultured umbilical vein endothelial cells and osteoblasts.
OBJECTIVE: To investigate the effect of strontium-doped calcium polyphosphate on angiogenesis-related behaviors of umbilical vein endothelial cells and osteoblasts co-cultured, including cell adhesion, spreading, proliferation, as well as the protein secretion of vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor from co-culture system in vitro.
METHODS: Human umbilical vein endothelial cells and osteoblastic cells (MG63) were utilized in this study. Cells from passage 3 were used for preparation of
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