REAGEN林可霉素酶联免疫反应测试盒说明书.doc

REAGEN?林可霉素酶联免疫反应测试盒RND99058 1．REAGEN?林可霉素酶联免疫反应测试盒为养殖者和政府监督管理部门提供了灵敏度为0.ppb的快速检测技术。： 快速。分钟之内可完成从肌肉，组织，饲料，尿液，牛奶中提取的全过程且回收率达到75-5%。 高重现性。 快速的检测（在不考虑样品数量的情况下只需不到2小时）。 2．原理 REAGEN?酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有的抗。 3.试剂盒组成已被抗的酶标板（可拆式）12×8孔 标准液（0，0.1，0.25，0.，1.，ppb）6×1.0mL 回收用1000ppb标准液（Spiking） 1×1.0mL HRP酶标抗1×6mL 200×样品提取液1×25mL 20×浓缩洗液1×30mL 终止液1×14mL TMB底物1×10mL 10XPBS 1×25mL 样品平衡液(Sample Balance Buffer) 1×0.5mL 本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。0℃或者冰冻保存。 4.检测限 检测物质 检测下限（ng/g） 交叉反应药物 交叉反应% 100 6．未提的设备或材料 酶标仪 恒温培养箱 移液器(10、20和100L，1mL各一支) 50-300uL） 7.注意事项 实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。 标准品中含有林可霉素，请小心使用。 不要使用过期的试剂盒。 不同批次的试剂盒不要混用，酶标物和微孔板具有盒与批次的特异性。 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。 8．试剂的准备 所有的试剂在使用之前应将其回温至室温，并在使用试剂前摇动几下，以保证合理的浓度。 （）×工作洗液 按1：19的比例浓缩液和双蒸馏水。。 （）×样品提取液 按1：9的比例配样品提取浓缩液和双蒸馏水。0.1 g吐温-20 到100 mL 1X PBS，混匀。 9．样品的准备 1 g 均匀样品 + 10 mL 1X 样品提取液， 涡旋1分钟. 离心 5 分钟4,000 x g 室温(20 – 25°C / 68 – 77°F). 取 0.5 mL 清液到新管. 孵育75°C 下5 分钟， 涡旋1分钟. 离心 5 分钟4,000 x g 室温(20 – 25°C / 68 – 77°F). 取0.2 mL 清液到新管, 加 5 μL 平衡液， 混匀. 取100 μL 每孔用于检测. Note: 稀释倍数: 10. 如果需要 第 6步后可以继续用1X PBS稀释 . 蜂蜜 取 0.5 g 到离心管.加3.5 mL 1X PBS. 在50 °C温育5 – 10 分钟，确保样品在PBS 溶解 . 涡旋1分钟. 离心 5 分钟4,000 x g 室温(20 – 25°C / 68 – 77°F). 取100 μL 到新管加入 400 μL 1X PBS. 涡旋1分钟. 取100 μL 每孔用于检测 稀释倍数: 40. 如果需要 第 6步后可以继续用1X PBS稀释. 肉/肝脏/肾 . 匀浆适量样品. 加 4.5 mL 1X 样品提取液到 0.5 g 匀浆样品. 涡旋1分钟. 离心 5 分钟4,000 x g 室温(20 – 25°C / 68 – 77°F). 取 0.5 mL 清液到新管. 孵育75°C 下5 分钟， 涡旋1分钟. 离心 5 分钟4,000 x g 室温(20 – 25°C / 68 – 77°F). 取0.2 mL 清液到新管, 加 5 μL 平衡液， 混匀. 取100 μL 每孔用于检测. 稀释倍数: 10. 如果需要 第 6步后可以继续用1X PBS稀释 . 牛奶 无脂奶用1X PBS-吐温 (1:19) 稀释(例如 20 μL 奶 + 380μL 1X PBS-吐温). 取100 μL 每孔用于检测。 全脂奶, 离心 5 分钟4,000 x g 室温(20 – 25°C / 68 – 77°F).除去脂肪， 用1X PBS-吐温 (1:19) 稀释(例如 20 μL 奶 + 380μL 1X PBS-吐温). 取100 μL 每孔用于检测. 稀释倍数: 20. 如果需要 可以继续用1X PBS稀释. 奶粉 称 2 g 奶粉加入10 mL 水，涡旋混匀. 离心 5 分钟4,000 x