人外周血卡介苗(BCG)特异性中央型和效应型记忆CD4+T细胞的特征①.pdfVIP

范艳莹等 人外周血卡介苗(BCG)特异性中央型和效应型记忆CD4十T细胞的特征 第5期 ·403 · ·分子与细胞免疫学 · 人外周血卡介苗(BCG)特异性中央型和效应型记忆CD4+T细胞的特征① 范艳莹② 杨利桃② 李 丽 昊长有 (中山大学基础医学院免疫学教研室，广州510080) 中国图书分类号 R392 文献标识码 A 文章编号 1000-484X(2006)05-0403-04 [摘 要I 目的:探讨正常人外周血BCG特异性记忆T细胞的特征。方法:分离PPD一和PPD正‘常人PBMCs，与BCG 进行培养，采用ELISA法检测细胞培养上清液中IFN-y的水平，ELISPOT法检测分泌IFN-，的细胞数，利用流式细胞仪在单个 细胞水平上检测细胞表面分子及细胞内因子IFN-y和IL-2的表达及其关系。结果:当BCG刺激后，PPD一正常人PBMCs不产 生或只产生少量的IFN-y，而PPD者IFN-y产生的量和细胞数均明显增加(P0.05)。流式细胞检测分析的结果表明，当 BCG刺激后，主要是CD4十而非CD8`T细胞表达IFN-y和IL-2，两者相比具有显著差异。在CW T细胞中单独产生IFN-y的 细胞占大多数，其次为IFN-，和IL-2双阳性细胞，只产生几一的细胞占少数。此外，85%-95%以上的CD4十IFN-丫T细胞为 CD45RO，其中60%以上的细胞为CCR7十，其余的为CCR7一。同样地，80%一95%左右的细胞为CD62L-。结论:BCG可以 诱导抗原特异性记忆CD4十T细胞的产生，其中大多数为中央型记忆CD4十T细胞，少数为效应记忆CD4十T细胞，提示其在预 防和控制结核分枝杆菌感染中发挥重要作用。 〔关键词]BCG;记忆T细胞;，一干扰素;CCR7;CD62L CharacterizationofmemoryTcellsfollowingstimulationwithBCG FANYan-Ying,YANGLi-Tao，LILi，WUChang-You.DepartmentofImmunology，MedicalCollege，SunYat-sen University,Guangzhou510080，China [Abstract] Objective;Toelucidatethecharacterizationofantigen-specificmemoryTcellsfromPPDindividualsafterstimula- tionwithBCGinvitro.Methods:PBMCswereisolatedfromPPD一/十normalhumanperipheralbloodandstimulatedwithBCG.The levelofIFN-yintheculturesupernatantswasassayedbyELISAandthefrequencyofIFN-y-producingingcellswasdetectedbyELIS- POT.Thesubsetsandfrequencyofcytokine-producingcellsweredeterminedatasinglecelllevelbyflowcytometry.Results:After stimulationwithBCG,PBMCsfromPPDbutnotPPD一individualsproducedsignificantlyhighlevelsofIFN-yinculturesupernatants detected场ELISA(P0.05)，similarresultswereconfirmedwiththeELISPOTdetection.Flowcytometricanalysisindicatedthat BCGcouldinduceIFN-yandIL-2productionpredominantlybyCW TcellsbutnotbyCD8T‘cells.Furtheranalysissuggestedthat 85%一95%CD4IFN--ycellswerememorycellsinwhichmorethan60%ofcellswereeffectormemory(CCR7)‘Tcellsandthe restofthemwerecentralmemoryTcells(CCR7一).Inaddition,80%一95%ofthecellswereCD62L一Conclusion:BCGcouldin- ducethegener