全血基因组DNA提取试剂盒使用说明.pdfVIP

全血基因组 DNA 提取试剂盒使用说明 货号：D1800 规格：50T/ 100T 保存：室温 (15℃-25℃) 干燥保存，复检期 12 个月，2℃-8℃保存时 间更长 。 试剂盒内容： 50T 100T RNase A 1ml 1ml ×2 蛋白酶 K 1ml 1ml ×2 红细胞裂解液 120ml 120ml ×2 溶液 A 15ml 25ml 溶液 B 15ml 30ml 漂洗液 15ml 15ml ×2 洗脱液 10ml 20ml 吸附柱 50 个 100 个 收集管 50 个 100 个 说明书 1 份 1 份 产品简介: 本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统， 提取全血基因组 DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材 料，能够高效、专一吸附 DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机 化合物。 提取的基因组 DNA 片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂 盒提取的基因组 DNA 可用于各种常规操作，包括酶切、 PCR、文库构建、 Southern 杂交等实验。 操作步骤： 使用前请先在漂洗液和溶液 B 中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上 的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、样 品 的处 理 (本 产 品适 用 于 处 理 新 鲜 的或 已经 添 加 抗 凝 剂 的 0.lml-1ml 血液样品)： a、在血液样品中加入 2-3 倍体积的红细胞裂解液，充分颠倒混匀， 12000rpm 离心 1min，小心吸去上清，沉淀应为白色或淡红色，如果裂解不 彻底，可重复以上述步骤一次。向沉淀中加 200ul 溶液 A，振荡至彻底混 匀。 b、 如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液，其红 细胞为有核细胞，因此处理量为 5-20u1，不需要再用红细胞裂解液处理，直 接加 200ul 溶液 A，振荡至彻底混匀。 2、向悬浮液中加入 20ul (10mg/ml) 的 RNase A，充分颠倒混匀，室 温放置 10min。 3、加入 20ul ( 10mg /ml ) 的蛋白酶 K，充分颠倒混匀，65℃水浴消 化 30-60min，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止。 4、加入 2 倍体积溶液 B(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)，充分 颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响 DNA 的提取，可将溶液和絮状 沉淀都加入吸附柱中，室温放置 2min。 5、12000rpm 离心 2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 6、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液 (使用前请先检查是否已加入无水乙 醇)， 12000rpm 离心 1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。 7、向吸附柱