纳米金_蛋白A介导抗体定向固定的压电传感及....pdfVIP

V ol. 26 高 等 学 校 化 学 学 报 　 N o. 2　 2 0 0 5 年 2 月 　　 　　　　　CHEM ICAL JOU RNAL O F CH IN ESE UN IV ERS IT IES　　　　　 　　 222～ 226　 纳米金- 蛋白A 介导抗体定向固定的 压电传感及电化学特性研究 丁艳君, 王　桦, 李继山, 沈国励, 俞汝勤 (湖南大学化学化工学院, 化学生物传感与计量学国家重点实验室, 长沙 410082) 摘要　以纳米金为载体标记蛋白A (PA ) , 用于介导抗体在压电石英晶体金电极表面的定向固定化. 以补体 C 1q抗体为模型, 采用压电传感技术实时监察了此敏感界面的免疫反应过程, 并考察了与补体C 1q 免疫反应的 压电响应性能. 金标 PA 固定抗体的方法与传统的直接PA 固定化方法相比较, 具有传感界面无需活化, 固 定抗体的免疫活性高等优点, 可对相应抗原进行高灵敏的压电免疫检测. 分别利用循环伏安和电化学交流 阻抗技术对金标PA 固定抗体及其免疫反应的动力学过程进行了表征. 关键词　纳米金; 抗体固定化; 石英晶体微天平; 循环伏安; 电化学阻抗谱 中图分类号　 657　　　　文献标识码　 　　　　文章编号(2005) O A [ 1 ] 在免疫检测过程中, 抗体的定向固定有利于抗体免疫性能的充分发挥 . 最常用的定向固定化方 法是通过利用蛋白A 特异结合抗体 F c 端的特性来固定抗体, 应用于生化目标物的免疫检测[ 2～ 4 ]. 但在 传统的基于PA 的定向固定化方法中, PA 是直接吸附于金电极表面的. 由于平板金容易引起蛋白质的 [ 5 ] 变性 , 降低了PA 的活性, 进而影响了其结合抗体的能力. 近年来, 新型纳米功能化材料的应用为构 建高性能的免疫传感技术平台提供了潜在的可能性, 利用纳米金颗粒固定酶、 及抗体等发展纳 DNA [ 6～ 11 ] ( ) 米颗粒增强的电化学和压电传感技术的报道较多 . 此外, 一些电化学技术如循环伏安 CV 和电化 学阻抗谱(E IS) 已逐步应用于电极表面修饰层的表征, 为评价许多生物体系电化学特性提供了无损的 [ 10～ 13 ] 分析手段 . 本文通过纳米金标记 PA 将补体 C 1q抗体定向固定于石英晶振表面,