食品中A.hydrophila探析方法研究.docVIP

食品中A.hydrophila分析方法研究 　　摘要：A.hydrophila原为水生细菌，广泛存在于淡水，海水及各河海交会口，故水产食品常可分离出此菌。除了水产品外，各种生肉类和内脏、即食肉类和生菜沙拉等此菌的检出率为5.15%和22.83%。此外，生牛奶、鲜乳、乳酪和冰淇淋也可分离出A.hydrophila。文章对食品中的A.hydrophila分析方法进行了研究 关键词：食品；A.hydrophila分析方法；水生细菌；水产食品；食品检测 文献标识码：A 中图分类号：TQ317 文章编号：1009-2374（2016）30-0067-02 DOI：10.13535/j.cnki.11-4406/n.2016.30.032 1 Aeromonashydrophila基本特性 Aeromonashydrophila属于弧菌科（Vibrionaceae）Aeromonad属，为革兰氏阴性的兼性厌氧杆菌，直径0.3～1.0μg/mL，长1.0～3.5μg/mL，具单一极鞭毛，有运动性。此菌为异营性（heterotrophic），能产生oxidase及catalase，并可利用某些碳水化合物产生酸或同时产气（CO2、H2），亦会水解esculin 2 传统分析方法 2.1 利用培养基分离 早期Aeromonas菌属的分离大多采用分离肠内菌属或海洋弧菌属的培养基，由于A.hydrophila具有lactose（+）及lactose（-）的菌株，而用以分离肠内病原菌的培养基中的碳水化合物成分，常会抑制Aeromonas菌属的生长。因此，一般用分离肠内菌的培养基MacConkeyagar或eosinmethyleneblueagar等并不适用。近年来，许多学者分别针对食品或水等不同的来源而发展出适用的培养基，且培养基中皆添加ampicillin来抑制其他杂菌的生长，更有利于Aeromonas菌属的回收。例如在临床上，对于此菌的分离大多采用5%sheepbloodagar，另外添加1030g/mL的ampicillin，配合此菌产生β-溶血素的能力来区分，皆较以往分离肠内菌的培养基佳。且由于A.hydrophila氧化酵素反应常与培养基成分有关，而用sheepbloodagar并不会对此反应造成干扰。对于食品中此菌的分离，同样可以ampicillin（10g/mL）作为抑制剂，starch则是用以区分的受质，当菌落形成后，加入Lugol’siodinesolution，菌落为amylase（+）者，即为A.hydrophila。此方法已被广泛应用于食品中A.hydrophila的分离，然而SA无法区分A.hydrophila与A.caviae 另外，Oxoid公司将XLD（xyloselysinedeoxycholate）修饰后发展出Ryan’sAeromonasmediumbase，再添加5μg/mL ampicillin，专用以分离Aeromonas及Plesiomonas菌属，前者为深绿色菌落，后者则为蓝灰色菌落（OxoidproductcodesCM833）。以SA、SGAP（starchglutamateampicillinagar）及RAM（RyansAeromonasmedium）来比较食品中A.hydrophila的分离率，结果三种选择性培养基皆有93%以上的分离率，并无显著差异 Tsai和Chen（1996）以三种选择性培养基SA、Bloodampicillinagar（BA）及OxoidAeromonasagar（OA）分离水产品中A.hydrophila，结果以BA分离出此菌的比率最高，SA及OA所得的典型菌落，经生化测试后，许多菌落为A.sobria或A.caviae，显示此两种选择性培养基对A.hydrophila、A.caviae以及A.veronii辨识度较差，可能是因为OA中的ampicillin浓度较低所致 水中A.hydrophila的分离则大多采用，先将样品增殖培养（enrichment）后，以膜过滤，再置于ADA上培养。而Holmes及Sartory（1993）以ADA、XAA、RAM及BIBA比较146个水样中Aeromonasspp.的分离率，结果以ADA及RAM回收率较好 2.2 利用生化特性鉴定 A.hydrophila的鉴定方法一般是参考Bergey’sManualofSystematicBacteriology进行各种生化测试，例如oxidase、catalase、starchhydrolysis、fermentationofglucose、mannitol、fructose、galactose、dextrin及esculin水