DNA 片段序列分析的策略.docVIP

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2017-06-01 发布于天津
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DNA 片段序列分析的策略.doc

第三节片段序列分析的策略一片段序列分析的策略原理将待测克隆于噬菌体载体上然后通过一定手段将待测片断化片断化的手段通常有超声波处理和酶切得到两端彼此重叠的部位不同的若干小片段再测出每一片段的序列将各片段的序列依次排列即能得出总的序列原理图示如定向测序定向测序的基本策略是沿着目的的同一个方向逐渐向前推进直至目的的另一端可采用嵌套缺失法或引物依次推进法嵌套缺失法是利用缺失随机突变原理先将目的克隆到载体上再用限制性内切酶在邻近其一端处切断载体使之变成端凹进端突出的线状再用外切酶或者加离子沿此末端逐步消化

第三节? DNA 片段序列分析的策略一、DNA 片段序列分析的策略?1．Primer walking????原理：将待测 DNA 克隆于噬菌体载体（M13）上，然后通过一定手段将待测 DNA 片断化（DNA 片断化的手段通常有超声波处理和酶切），得到两端彼此重叠的部位不同的若干小片段，再测出每一片段的序列，将各片段的序列依次排列，即能得出总的序列。原理图示如6-5： 3．定向测序　????定向测序的基本策略是沿着目的 DNA 的同一个方向逐渐向前推进，直至目的 DNA 的另一端。可采用嵌套缺失法或引物依次推进法。????嵌套缺失法是利用缺失随机突变原理，先将目的 DNA 克隆到载

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