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本文由29商业源码网提供,盗版必究!! 3 植物组织培养 3.1定义 从植物体分离符合需要的器官、组织或细胞（含原生质体）等作为外植体，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养，使培养或操作对象表现生长发育等生命活动，以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他生物产品的一种技术。 广义上是指所有类型的植物无菌培养技术 植物培养 胚胎培养 器官培养 组织培养 细胞培养 原生质体培养 狭义上，则指的是愈伤组织培养。即以植物外植体增殖而形成的愈伤组织为培养物的培养。这是因为绝大多数植物组织或器官均可在人为控制条件下诱导形成愈伤组织，而且几乎在所有植物离体培养过程中都伴有愈伤组织产生。 外植体：第一次用于接种的材料 初代培养: 外植体的最初培养 继代培养: 将初代培养获得的培养物移植到新培养基中，这种反复多次移植的培养称继代培养. 增殖率：每一次继代后所获得的培养物与继代前的比值。 固体培养: 加了琼脂等凝固剂于培养基中使之凝固. 液体培养 固液培养：先加固体培养基凝固后，再加液体培养基。 悬浮培养：培养物悬浮于液体培养基上. 愈伤组织: 是指在培养或自然条件下，植物细胞脱分化，不断增殖所产生的主要由薄壁细胞构成的不定形的组织. 脱分化：已分化静止的细胞开始分裂，改变原有细胞结构和功能，回复到无结构分生组织状态形成愈伤组织。 再分化: 从愈伤组织分化细胞团中再分化成完整植株。 不定芽：从非正常出芽的部位经诱导而长出的芽。 不定根：从非正常出根的部位经诱导而长出的根。 胚状体：组织培养中，培养细胞有时可以分化出具有胚芽、 胚根、 胚轴等类似于胚胎的结构，这种由愈伤组织不经过有性过程而直接诱导产生的类似胚的结构称胚状体。 3.2.植物组织培养的特点 主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。具体表现： ①培养的整个过程都是在无菌条件下进行的，外植体、培养基、接种环境都须经过无菌处理。 ②组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的，培养基中包含了植物生长所需的水分和一切大量元素、微量元素、有机物和植物激素，pH和渗透压也是人为设定的。培养的材料处于完全异养状态。 ③培养的起始材料可以是植物的器官、组织、细胞、小孢子、胚乳、原生质体，它们都处于离体状态下，在组织培养条件下均能再生完整植株。 ④培养物通过连续继代培养可以不断增殖，形成克隆，或通过改变培养基成分，特别是其中的植物激素的种类和配比，而达到不同的实验目的，如茎芽增殖或生根 ⑤组织培养是在封闭的容器中进行的，容器内气体和环境气体可通过瓶塞或其他封口材料进行交换。容器内的相对湿度几乎是100 %，因此，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质层，且气孔保卫细胞功能缺乏，气孔始终都是张开的。 ⑥组织培养的环境温度、光照强度和时间等都是人为设定的，找出这些物理因素的最适参数对组织培养的成功也很重要。 4.研究类型和任务 5.植物组织培养的形成与发展 5.1 理论渊源 （1838-1902） 1667年，虎克发现细胞 1838年，施莱登提出植物细胞学说 1839年，施旺认为细胞学说也适用于动物 5.1 理论渊源 （1838-1902） 主要之点：细胞是生物体的基本结构单位，由它构成整个生物个体，同时，植物细胞又是在生理上、发育上具有潜在全能性的功能单位。正如施旺所说：如果具有存在于有机体内一样的条件，每个细胞应该可以独立生活和发展。 5.2 理论奠基及探索（1902-1933） 1902年，哈布兰特(Haberlandt)根据细胞学说原理，提出了高等植物的组织和器官可以不断分割，直到单个细胞。 5.2 理论奠基及探索（1902-1933） 1904年，德国植物胚胎学家汉宁用萝卜和辣根胚培养，长成小植株，这是离体培养的第一个成功例子。 1933年，李继侗将3mm以上的银杏胚培养成功，同时发现胚乳提取物促进离体胚的生长。 5.3 组培技术建立（1933-1943） 1934年美国的White等用番茄根尖的组织培养，首次建立了活跃生长的无性繁殖系．1937年，White又发现B族维生素和吲哚乙酸，对离体根的生长有重要作用．他最早设计出适于植物组织培养的合成培养基配方。培养基是无机盐、糖类和酵母提取物。 5.3 组培技术建立（1933-1943）Gautheret 1934年培养山毛柳、黑杨的形成层时，可以不断地增长几个月。这项技术的关键是使用了固体培养基。 1937-1938年他在培养基中加入IAA和维生素B等物质，结果使柳树形成层的生长大为增加。 法国的另一位学者Nobecourt(1937-1938)培养胡萝卜根和马铃薯的块茎薄壁组织，也使细胞增殖