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微波萃取鱼腥草中黄酮的工艺
微波萃取鱼腥草中黄酮的工艺
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??? 【摘要】:实验为在鱼腥草中提取黄酮的工艺,其鱼腥草中总黄酮的萃取工艺流程 鱼腥草→粉碎→称重→水浸泡→微波处理→过滤→稀释定容→样品液。鱼腥草提取黄酮所用条件微波的火力为640w、微波间歇作用时间为5 min、固液比(鱼腥草干粉质量(g)与乙醇溶液体积(ml))比例为1:40)1:40(g/ml)以及浸泡时间为60 min。
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??? 【关键字】:微波、萃取 、鱼腥草、黄酮
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??? 鱼腥草(Ordate houttuyania)是一种常见的中草药,含有黄铜、有机酸、无机盐等多种药成分【1、2】,特别是含有丰富的黄酮类化合物【3】,作为一种天然的保健食品和温和的药物而广泛流传于普通老百姓的生活之中。
??? 鱼腥草,俗称猪鼻孔、侧耳根,为三白草科(saururaceae)蕺菜属植物蕺菜(houttuynia cordata)的全草,始载于《名医别录》,是国家卫生部正式确定为“药食两用”的品种之一,其性味辛、寒,具有清热解毒、消肿排脓、利尿涌淋的功效。鱼腥草作菜,生食最佳,其香气独特、口感别具、风味适口可人。凉拌佐餐使人大开胃口,增进食欲、改善消化功能,也有炒食、煎汤、煮粥、炖肉的不同食疗方法。 鱼腥草入药,中医认为其味辛、性寒凉,能清热解毒、排痛消肿疗疮、利尿除湿、健胃消食,用治实热、热毒、湿邪、疾热为患的肺痈、疮疡肿毒、痔疮便血、脾胃积热等,单用或配伍复方,内服外用或民间多种食疗方法的使用均疗效确切。药理研究,鱼腥草主含挥发油,癸酰乙醛鱼腥草素等多种成份,对各种致病杆菌、球菌、流感病毒、钩端螺旋体等有抑制抗菌作用,并能提高人体免疫调节功能。有资料表明,国外从鱼腥草中分离出一种防癌抗癌物质,除对胃癌有效外,并对中晚期肺癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、直肠癌也有一定的治疗调整作用。关于鱼腥草的研究,国内主要集中在药用痰热喘咳、热痢热淋、痛肿疮毒及挥发油的研究上,而对鱼腥草黄酮提取工艺的系统研究较少。【4】
材料、试剂和仪器
??? 鱼腥草茎叶干草,芦丁标准品,实验用水(二次蒸馏水),高速万能粉碎机,微波催化合成/萃取仪,分光光度计等。
样品制备
??? 鱼腥草的前处理挑选无病虫害、无霉变的鱼腥草茎叶干草,将鱼腥草茎叶分开,均先用自来水洗净,再用实验用水冲洗后,于60℃的烘箱中烘干,用粉粹机粉碎至60目,装袋存放于干燥的环境中备用。
步骤
鱼腥草中总黄酮的萃取工艺流程:鱼腥草→粉碎→称重→水浸泡→微波处理→过滤→稀释定容→样品液。
微波萃取:称取适量的粉碎后的鱼腥草样品,放入三角烧瓶中,用浓度为60%的乙醇溶液浸提(鱼腥草干粉质量(g)与乙醇溶液体积(ml)比例为1:40),将三角瓶至于微波腔中,装上冷凝管,在微波萃取系统中,用微波功率640 W,萃取温度70℃,微波间歇作用5 min,浸泡约60min。萃取完成后,稍冷,过滤,用乙醇溶液润洗烧瓶和残渣三次,合并滤液。
对照品溶液的制备:称取干燥至恒重的芦丁对照品20 mg,加60%的乙醇溶解,置于50 ml容量瓶中,加60%的乙醇至刻度,摇匀。吸取10 ml上述溶液,置于100 ml容量瓶中,加纯化水至刻度,摇匀备用。
标准曲线的绘制: 精密吸取芦丁对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml,分别置于25 ml容量瓶中,各加入30%的乙醇使其体积为6.0 ml,然后分别加入5%的亚硝酸钠溶1 ml,摇匀,放置6 min;加入10%的硝酸铝溶液1 ml,摇匀,放置6 min;加入1 mol/L氢氧化钠溶液10 ml,加纯化水定容至25 ml,摇匀,放置15 min,以30%的乙醇作参比,于510 nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,以质量浓度为横坐标,得标准曲线。标准曲线方程为Y=6.019X+0.0.005 9,r=0.9995,线性范围为0.008~0.048 mg/ml。
鱼腥草中总黄酮含量的测定:吸取按设定条件制备的供试品溶液20 ml,置50 ml容量瓶中,加入30%的乙醇5.0 ml,加入5%亚硝酸钠溶液1.5 ml,捣匀,放置6 min;加入10%硝酸铝溶液1.5 ml,掏匀,放置6 min;加1mol/L氢氧化钠溶液20 ml加水至刻度,掏匀,放置15 min。以30%乙醇作参比,于510 nm波长处测定吸光度,代入标准曲线方程求得供试品溶液中总黄酮的含量,再换算成鱼腥草中总黄酮的含量。【5】
??? 由此可得到鱼腥草中总黄酮的含量。
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参考文献:
【1】 《中药辞海》编审工作委员会,中药辞海(第二卷).北京:中国医药科技出版社,1996
【2】 ?盛清,任玉翠,周彦刚,鱼腥草制剂中黄酮含量测定.浙江省医学科学报,19
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