第五章 结晶法.pptVIP

第五章 结晶（Crystallization ） 第一节 结晶技术概述 一、结晶的概念 1.1 概念 结晶是从液相或气相中产生形状一定、分子（或原子、离子）有规则排列的晶体的现象。 结晶可以从液相或汽相中生成，但工业结晶操作主要是以液体原料为对象。改变溶液的某些条件，使溶液中的溶质分子有规则排列并以结晶态析出的过程称作结晶。 有时把析出的晶体称作结晶。 晶体的化学成分均一，具有各种对称的形状，离子和分子在空间晶格的结点上呈规则排列。 固体有结晶和无定形两种状态。 结晶：粒子排列有规则。溶质分子需要有足够时间进行排列，故析出速度慢。 无定形固体：粒子排列无规则，析出速度快。 相同点： 都是新相生成的过程，是利用溶质之间溶解度的差别进行分离纯化的一种扩散分离操作。 区别： ①结晶是内部结构的质点元做三维有序规则排列、形状一定的固体粒子。而沉淀则是无规则排列的、无定型粒子。 ②结晶的纯度远高于沉淀，结晶的形成需在严密控制的操作条件下进行。 结晶是溶质自动从过饱和溶液中析出，形成新相的过程。 结晶过程是一个表面化学反应过程。 这一过程不仅包括溶质分子凝聚成固体，还包括这些分子有规律地排列在一定晶格中，过程与表面分子化学键力变化有关。 结晶是一种历史悠久的分离技术，5000年前中国人已开始利用结晶原理制造食盐。广泛用于化学工业，在氨基酸、有机酸、抗生素生产过程中已成为重要的分离纯化手段。 大多数固体产品都是以结晶的形式出售的，因此，在产品的制造过程中一般都要利用结晶技术。 对生化制药来说 1、结晶是一种纯化手段； 2、是一种固化手段 (从溶液中取得固体溶质）； 3、分子呈规则性排列的晶体是生物活性物质高级结构以及结构与功能关系的研究材料。 结晶理论是通过无机盐的结晶现象研究发展起来的，其基本原理也适用于生物产物的结晶，但生物大分子的结晶和简单无机盐的结晶并非完全相同，生物大分子的结晶要比小分子结晶困难。 （1）生物大分子的运动和规则排列要比小分子物质困难得多，需要的时间和能量也较多。 多糖、蛋白质、酶和核酸等由于分子量大，结构复杂，不易定向聚集。生物大分子都是由相同或相似的小分子“单体”缩合而成。如蛋白质和酶由20种氨基酸通过肽键组成，多糖类由一种或数种单糖通过糖苷键组成，两大类核酸由4种核苷酸通过磷酸二酯键连接而成。 要求：一方面溶液条件的变化不宜太快、太剧烈，另一方面在分子有序排列十分困难时还要提供结晶的“模板”即晶种。 （2）生物大分子具有形成晶体的能力，但这种能力与大分子结构和外形有很大关系。 一般来说，支链较少、对称的分子比支链多、不对称的分子容易结晶； 分子量小，易结晶。分子量越大越难结晶， 例如大多数球蛋白和酶蛋白比较容易结晶，一些大小均匀的病毒特别是植物球状病毒，也比较容易得到结晶，高度不对称的核酸大分子，与蛋白质相比则较难结晶(在一定条件下，小心操作，也可获得一定结晶度的固体)。 还有一些结构复杂，不对称的核酸、蛋白质和多糖类，迄今仍未能获得晶体。 （3）生物大分子的晶体常含有结晶水。 如许多蛋白质和酶的结晶水含量常达10%～50%。麻仁蛋白、溶菌酶的晶体水分分别占晶体重量39.2%和48%，而原肌球蛋白的长角片晶中水占总重90%，可见水在蛋白质晶体中占的比重相当大。 （4）生物大分子有共晶现象存在。 如猪糜胰蛋白酶的共结晶体。它是我国生物化学家戚正武首先报道的。猪糜蛋白酶与猪胰蛋白酶的混格晶体分子比为3：2。多次重结晶不能将二者分开。 二、结晶操作的特点 （1）只有同类分子或离子才能排列成晶体，因此结晶过程有良好的选择性。 （2）通过结晶，溶液中大部分的杂质会留在母液中，再通过过滤、洗涤，可以得到纯度较高的晶体。 （3）结晶过程具有成本低、设备简单、操作方便等特点，广泛应用于氨基酸、有机酸、抗生素、维生素、核酸等产品的精制。 三、结晶基本原理 (结晶过程分析) 溶解度是温度的函数。 一般在说某物质在特定溶剂中的溶解度时，并不是给出一个数值，而是给出一系列数值，这系列数值用一条曲线来表示，即温度-溶解度曲线，又叫饱和曲线。 大多数物质的溶解度随温度的升高显著增大，也有一些物质的溶解度对温度的变化不敏感，少数物质(如螺旋霉素)的溶解度随温度升高而显著下降。 除温度外，溶剂的组成(例如，有机溶剂与水的比例、其他组分、pH和离子强度等)对溶解度亦有显著影响。 因此，调节pH、离子强度和有机溶剂或水浓度是氨基酸、抗生素等生物产物结晶操作的重要手段。 在物性不同的溶剂中溶质的温度-溶解度曲线是结晶操作设计的基础。 以上溶解度情况是指大颗粒晶体即普通晶体溶质的饱和浓度。 微小晶体的半径越小，溶解度越大。 这一热力学现象已被许多实验结