转基因小鼠技--术课件.ppt

* * 16. 1987-89年 -- 第一只基因敲除小鼠 Martin Evans，Oliver Smithies 和 Mario Capecch 领导的几个研究小组--- 2001获得了Lasker奖 17. 1996年 -- “百慕大法则” 公共基因组序列数据 18. 1998年?-- 克隆鼠 1997年克隆羊“多莉”诞生之后，夏威夷的一个小组培育出了第一批克隆鼠——“Cumulina”和她的姐妹们。 15. 1983年 -- PCR Kary Mullis --1993年的诺贝尔奖 小鼠的历史 * * 19. 1999年 -- 小鼠基因组测序协会 人类基因组三个主要测序中心（The Wellcome Trust Sanger Institute, The Whitehead Center for Genome Research 和 Washington University Genome Sequencing Center）成立了一个相互协作的小鼠基因组测序机构，取名为小鼠基因组测序协会（Mouse Genome Sequencing Consortium ,MGSC) 20. 2001年2月 -- 人类基因组 21. 2001年6月 -- 散弹法 美国公司Celera Genomics 使用散弹法测得了用于销售的小鼠序列草图。散弹法是一种一次性测得基因组全序列的技术。 小鼠的历史 * * 22. 2002年5月 -- 16号染色体与已被分析的人类 21号染色体序列高度相似 23. 2002年8月 -- 小鼠基因组物理图谱 24. 2002年12月?-- 小鼠基因组 小鼠基因组测序协会发表了一份高质量的小鼠基因组序列草图，并且同时对C57BL/6J小鼠株系做了分析。这个基因组大小约为2.5Gb，比人类基因组要小，预计的基因也少于30000个。约有40%的小鼠和人类基因组序列相高度似性，80%的人类基因在小鼠基因组中能找到相应的基因。同时还有不少文章对小鼠遗传组成的其它方面做了详细讨论。在日本RIKEN 基因组科学实验室的努力下，很多相关的重要资源都能够被免费获取。 小鼠的历史 * * 转基因小鼠技术的应用 基因表达调控、基因功能及发育调控作用的研究 基因工程定向育种 转基因动物生物反应器研制 人类疾病小鼠模型与基因治疗 药理学研究 器官移植 环境科学研究 * * 基因表达调控、基因功能及发育调控作用的研究 Hox gene(同源异形盒基因） 疾病基因 学习与记忆基因 生理周期基因 基因表达有时空与组织的特异性； 外源基因的表达受特异性有关顺式作用序列的调控； * * 基因工程定向育种 向动物体转移外源基因并使之在动物体内表达，能够克服物种间固有的生殖隔离，实现动物育种之间遗传物质的交换。 实质是将基因转移与传统育种方法结合，各取其精华，快速创造新的目的变异和固定扩展变异，从而快速培育出高产优质和抗逆动物品种。 转基因羊、猪、鸡、鱼、鼠等 * * 转基因动物生物反应器研制 转基因动物生物反应器概念： 将具某种重要应用价值的生物活性蛋白基因导入动物受精卵或早期胚胎，培育转基因动物，使外源基因在动物的特定组织内高效表达，再从这些组织的分泌液、浸出液或血清中分离提取目的基因产物。 乳腺---理想器官 肾脏和膀胱 多肽药物、蛋白质疫苗、酶类 细菌-动物细胞-转基因动物 * * 乳腺生物反应器具有以下特点：⑴乳腺是自我封闭系统，乳腺表达的蛋白质不回流到血液循 环系统，避免外源基因表达的蛋白质对动物本身的影响；⑵乳腺组织是一种有效的蛋白质合成器； 一头奶牛一年可生产乳蛋白250—300Kg，一只绵羊或山羊 一年可生产乳蛋白25—30Kg。如果有百分之一的乳蛋白代 换成医用蛋白，产量十分可观。⑶乳腺分泌的基因产物不但产量高，而且易提纯。表达的蛋 白经过充分的修饰加工，具有稳定的生物活性。生物活性 接近天然产品；⑷在动物乳腺表达的外源基因可以遗传，可用常规技术繁殖 生产群体。 转基因动物生物反应器研制 * * 转基因动物生物反应器研制 乳腺组织特异表的基因：具milk box保守序列 ----乳清蛋白基因 ----b乳球蛋白基因 ----酪蛋白基因 已开发的产物： ----血栓治疗药物（组织型纤溶酶原激活因子) ----出血性疾病（凝血因子VIII，IX） ----免疫治疗药物（IFN，IL，TNF） ----营养制剂(人乳铁蛋白） * * 人类疾病小鼠模型与基因治疗 癌症---肺癌---p53功能缺陷 遗传病---地中海贫血（临床失败---细胞表达？） AD ---对AD患者死亡后脑部解剖发现脑部存